Anticorpo Policlonale di Coniglio anti-Asymmetric DiMethyl-Histone H4-R3 (P62805) per WB, IHC-P, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H4

L'istone H4 è un componente fondamentale del nucleosoma, l'unità base della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H2B e H3, forma un ottamero attorno al quale il DNA si avvolge, compattando il genoma e regolando l'accesso al materiale genetico. Questo ruolo strutturale è essenziale per la regolazione della trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione del DNA e la stabilità cromosomica. Le funzioni degli istoni sono altamente regolate da un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (PTM), collettivamente indicate come "codice istonico", che alterano la dinamica della cromatina e le interazioni proteiche.

La dimetilazione asimmetrica dell'istone H4 all'arginina 3 (H4R3me2a) è una specifica PTM catalizzata dalla protein arginine metiltransferasi 1 (PRMT1). Questa modifica avviene sulla coda N-terminale flessibile dell'H4 ed è implicata nell'attivazione trascrizionale e nella regolazione epigenetica. La modifica crea un sito di aggancio per proteine effettrici che interpretano il segnale di metilazione, influenzando così i pattern di espressione genica.

Riferimenti correlati: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

L'istone H4 è localizzato prevalentemente nel nucleo ed è associato ai cromosomi durante tutto il ciclo cellulare. La sua sequenza altamente conservata negli eucarioti sottolinea la sua fondamentale importanza biologica. Oltre alla dimetilazione asimmetrica, la coda N-terminale dell'H4 subisce molte altre modificazioni, tra cui acetilazione, fosforilazione e dimetilazione simmetrica, che collettivamente orchestrano la funzione della cromatina.

Questo anticorpo riconosce specificamente il segnale di dimetilazione asimmetrica in R3, consentendo uno studio dettagliato di questa modifica epigenetica in vari contesti biologici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico portante la modifica di dimetilazione asimmetrica in R3. Per confermare la specificità dell'anticorpo, considerare di eseguire saggi di competizione con peptide utilizzando sia peptidi metilati che non metilati.
• Per il Western blot, è consigliato un protocollo standard di estrazione degli istoni per arricchire le proteine legate alla cromatina. Il peso molecolare previsto per l'istone H4 è di ~11 kDa. Eseguire SDS-PAGE in condizioni appropriate (ad es. gel al 15%) per una risoluzione ottimale degli istoni a basso peso molecolare.
• In immunoistochimica (paraffina), potrebbe essere necessario un recupero dell'antigene. Ottimizzare il metodo di recupero e la diluizione dell'anticorpo utilizzando appropriati controlli tissutali positivi e negativi.
• Si prevede che questo anticorpo reagisca in modo incrociato con umano, topo, ratto e altre specie. Tuttavia, la reattività incrociata nel vostro specifico sistema sperimentale dovrebbe essere verificata utilizzando controlli disponibili.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, la consistenza da lotto a lotto dovrebbe essere valutata per saggi quantitativi critici. Considerare di includere un controllo di caricamento come l'istone H4 totale o una proteina domestica.

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