Anticorpo Policlonale di Coniglio ATF1 per WB, IP, ELISA - P18846

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATF-1

• ATF-1 (Fattore di Trascrizione Attivatore 1) è un fattore di trascrizione dipendente da AMP ciclico codificato dal gene ATF1, appartenente alla famiglia CREB/ATF dei fattori di trascrizione a cerniera di leucina basica (bZIP).
• Lega l'elemento di risposta al cAMP (CRE; consenso 5'-GTGACGT[AC][AG]-3') presente in molti promotori virali e cellulari, e anche l'elemento responsivo a Tax (TRE) di HTLV-I.
• ATF-1 media la stimolazione indotta dalla proteina chinasi A (PKA) dei geni reporter CRE, collegando la segnalazione cAMP all'espressione genica.
• Agisce come repressore trascrizionale di geni di detossificazione antiossidante come FTH1, implicandolo nelle risposte allo stress ossidativo.
• ATF-1 innesca la proliferazione e trasformazione cellulare ed è coinvolto in riarrangiamenti cromosomici nelle neoplasie maligne (es. fusioni EWS-ATF1 e FUS/ATF-1).
• La proteina è localizzata esclusivamente nel nucleo, in linea con il suo ruolo di fattore di trascrizione.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione (fosfoproteina) e ubiquitinazione (coniugazione Ubl), e subisce splicing alternativo.
• Le parole chiave Uniprot evidenziano le sue funzioni: legame al DNA, attivatore, regolazione della trascrizione e coinvolgimento nel riarrangiamento cromosomico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato era una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-210 di ATF1 umano, che include la regione N-terminale. Questa regione è ben conservata e può essere adatta per rilevare la proteina ATF-1 totale, ma la reattività crociata con altri membri della famiglia strettamente correlati (come CREB) dovrebbe essere valutata mediante allineamento di sequenze.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di 29 kDa; considerare l'uso di percentuali di gel appropriate e controlli di carico. Validare la specificità utilizzando linee cellulari pertinenti (es. HeLa, HEK293) e tessuti di topo.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), assicurare la stabilità del complesso anticorpo-antigene; testare varie condizioni del tampone di lisi per mantenere le interazioni proteiche.
• In ELISA, l'uso di uno standard peptidico o proteico può aiutare a quantificare i livelli di ATF-1; verificare la linearità e la sensibilità.

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