Anticorpo policlonale coniglio ATF6 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18850

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ATF6

• ATF6 è un precursore di fattore di trascrizione incorporato nella membrana del reticolo endoplasmatico (RE). Lo stress del RE innesca il suo processamento proteolitico, rilasciando il frammento N-terminale attivo che transloca nel nucleo per avviare la risposta alla proteina srotolata (UPR). Riferimenti correlati: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464
• L'ATF6 processato si lega agli elementi di risposta allo stress del RE (ERSE, 5'-CCAAT-N₉-CCAC[GA]-3' ed ERSE II, 5'-ATTGG-N-CCACG-3') come eterodimero con NF-Y, attivando i geni target della UPR. Riferimenti correlati: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:11163209
• ATF6 può anche regolare la trascrizione mediata dal fattore di risposta sierica e svolge un ruolo nello sviluppo della fovea retinica e nella funzione dei coni. Riferimenti correlati: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:26029869
• Localizzazione subcellulare: Il precursore risiede nelle membrane del RE e dell'apparato di Golgi; dopo il processamento, il dominio del fattore di trascrizione si localizza nel nucleo.
• ATF6 è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani.
• Il precursore è una glicoproteina N-legata e può essere modificata tramite ubiquitinazione. La proteina è una proteina di membrana di tipo II a passaggio singolo (segnale-ancora) con l'estremità N rivolta verso il citoplasma e l'estremità C nel lume del RE.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno degli amminoacidi 600-670 dell'ATF6 umana (NP_031374.2), situato nel dominio lumenale C-terminale. Questa regione è presente nel precursore a lunghezza intera (~75 kDa). Il rilevamento della forma nucleare clivata (~50 kDa) può variare a seconda dell'accessibilità dell'epitopo; validare in modelli appropriati di stress del RE.
• Per il Western blot, è prevista una banda vicino a 75 kDa per il precursore. Trattare le cellule con induttori di stress del RE (es. tunicamicina, tapsigargina) per osservare il processamento e la translocazione nucleare.
• Per IHC-P, considerare il recupero dell'antigene con tampone citrato o EDTA e confermare la specificità del segnale con controlli adeguati.
• In IF/ICC, ATF6 mostra un pattern reticolare RE/Golgi in condizioni basali e si ridistribuisce nel nucleo dopo l'induzione dello stress; utilizzare fissazione e permeabilizzazione appropriate.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; ottimizzare le condizioni di rivestimento e di blocco.

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