Anticorpo policlonale di coniglio anti-ATP6V1A per WB, ELISA - P38606

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ATP6V1A

• ATP6V1A codifica la subunità catalitica A del dominio V dell'H+-ATPasi vacuolare (V-ATPasi), un enzima multisubunità che accoppia l'idrolisi dell'ATP alla traslocazione dei protoni (PMID:8463241, PMID:22053050). I nomi alternativi noti includono subunità da 69 kDa della V-ATPasi, isoforma VA68 dell'ATPasi vacuolare e subunità alfa della pompa protonica vacuolare. Riferimenti correlati: PMID:8463241 PMID:22053050

• Il complesso V-ATPasi è essenziale per acidificare e mantenere il pH dei compartimenti intracellulari e, in alcuni tipi cellulari, si localizza sulla membrana plasmatica per favorire l'acidificazione extracellulare (PMID:32001091). Riferimenti correlati: PMID:32001091

• Sulla membrana lisosomiale, la V-ATPasi attiva mTORC1 promuovendo l'attività di fattore di scambio dei nucleotidi guaninici del complesso Ragulator (PMID:22053050). Riferimenti correlati: PMID:22053050

• In condizioni aerobiche, ATP6V1A contribuisce all'omeostasi intracellulare del ferro attivando gli enzimi prolil-idrossilasi (PHD) di Fe(2+), che idrossilano HIF1A e lo indirizzano alla degradazione proteasomiale (PMID:28296633). Riferimenti correlati: PMID:28296633

• La proteina può svolgere un ruolo nello sviluppo dei neuriti e nella connettività sinaptica (PMID:29668857). Riferimenti correlati: PMID:29668857

• ATP6V1A è prevalentemente citosolica, ma si localizza anche in vescicole rivestite di clatrina, vescicole secretorie e membrane lisosomiali.

• È stata osservata un'elevata espressione della proteina nella pelle. Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, mentre lo splicing alternativo genera molteplici isoforme. Il gene è associato a malattie quali l'epilessia.

• Durante l'infezione da virus della rabbia, ATP6V1A facilita lo scapsidamento dei virioni interagendo con le proteine M della matrice virale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 500–600 di ATP6V1A umano (NP_001681.2). Questa regione può essere conservata tra le specie, in accordo con la reattività crociata riportata nel topo.

• Per il Western blot, si prevede una banda con migrazione prossima a 68 kDa. Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando controlli di knockdown o knockout nel sistema cellulare o tissutale pertinente.

• Le condizioni dell'ELISA devono essere ottimizzate utilizzando proteina ricombinante ATP6V1A o standard peptidici; il legame aspecifico può essere ridotto con tamponi di blocco appropriati.

• Poiché la V-ATPasi è espressa ubiquitariamente ma arricchita nella pelle, i lisati di cheratinociti o fibroblasti umani possono fungere da controlli positivi.

• Se si estende l'applicazione all'IHC o all'IF, considerare l'epitopo bersaglio dell'anticorpo nel contesto di una proteina ripiegata e verificare le prestazioni in condizioni native.

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