Anticorpo monoclonale coniglio ATR per WB, IF/ICC, ELISA - Q13535

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'ATR

• ATR è una chinasi proteica serina/treonina che funziona da sensore di danno al DNA, attivando la segnalazione del checkpoint in risposta a stress genotossici inclusi radiazioni ionizzanti, UV e stallo della replicazione. Riferimenti correlati: PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164
• Riconosce il motivo consenso [ST]-Q e fosforila substrati chiave come BRCA1, CHEK1, MCM2, RAD17 e p53/TP53, inibendo collettivamente la replicazione del DNA e la mitosi mentre promuove la riparazione, la ricombinazione e l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061
• ATR fosforila la variante dell'istone H2AX alla Ser-139 nei siti di danno al DNA, un tratto distintivo della risposta al danno al DNA. Riferimenti correlati: PMID:11673449
• È richiesto per l'ubiquitinazione di FANCD2 ed è critico per il mantenimento della stabilità dei siti fragili e la regolazione della duplicazione del centrosoma. Riferimenti correlati: PMID:15314022, PMID:12526805
• ATR agisce come regolatore della transizione S-G2 limitando l'attività di CDK1 durante la fase S per prevenire l'ingresso prematuro in mitosi. Riferimenti correlati: PMID:30139873
• All'involucro nucleare, ATR funziona da sensore di stress meccanico, media la rottura dell'involucro nucleare indotta dal danno al DNA tramite la fosforilazione di LMNA e innesca l'attivazione immunitaria innata attraverso la rottura dei micronuclei e la via cGAS-STING. Riferimenti correlati: PMID:25083873, PMID:37832547, PMID:37788673
• ATR è espresso ubiquitariamente con i livelli più alti nei testicoli; una isoforma alternativa 2 è rilevata nel pancreas, nella placenta e nel fegato.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione all'interno degli amminoacidi 400-500 dell'ATR umano; considerare l'uso di questa regione sequenziale per esperimenti competitivi o di controllo.
• Per il Western blot (WB), notare la grande dimensione proteica (~301 kDa); ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare (es., gel a bassa acrilamide, tempi di trasferimento estesi).
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), validare i pattern di localizzazione nucleare e dell'involucro nucleare coerenti con la distribuzione subcellulare dell'ATR.
• Per l'ELISA, assicurare il rivestimento con peptide o proteina ricombinante; confermare la specificità dell'anticorpo con controlli appropriati.
• La reattività crociata è riportata per l'umano; se si estende ad altre specie, verificare l'omologia di sequenza nella regione immunogenica.

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