Anticorpo policlonale coniglio BCL6 per WB, IF/ICC, ELISA - P41182

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BCL6

• BCL6 è un repressore trascrizionale contenente domini a dito di zinco e BTB (noto anche come BCL-5, LAZ-3, ZBTB27, ZNF51) che svolge un ruolo centrale nella formazione del centro germinativo e nella maturazione dell'affinità degli anticorpi.
• Reprime i geni bersaglio legandosi direttamente alla sequenza di DNA 5'-TTCCTAGAA-3' o indirettamente interagendo con fattori di trascrizione, e recluta corepressori e istone deacetilasi per mediare la repressione.
• Nelle cellule B del centro germinativo, BCL6 sopprime i geni coinvolti nella differenziazione, nell'apoptosi, nell'infiammazione e nel controllo del ciclo cellulare, consentendo una rapida proliferazione e la tolleranza delle rotture del DNA durante la ricombinazione a scambio di classe e l'ipermutazione somatica senza indurre l'apoptosi dipendente da p53.
• BCL6 promuove anche lo sviluppo delle cellule T helper follicolari inibendo la differenziazione TH1, TH2 e TH17, ed è richiesto per la memoria immunologica sia nelle cellule T che B.
• Si localizza esclusivamente nel nucleo ed è espresso prevalentemente nelle cellule T e B del centro germinativo e nelle cellule dendritiche immature primarie.
• Funzioni aggiuntive includono la soppressione della proliferazione dei macrofagi competendo con STAT5 per i motivi di legame, il controllo dell'arresto del ciclo cellulare in risposta allo stress genotossico e la regolazione della neurogenesi tramite il silenziamento dei geni bersaglio di NOTCH.
• Parole chiave: Proto-oncogene, coinvolto in riarrangiamenti cromosomici nei linfomi, contiene motivi a dito di zinco, acetilazione, fosforilazione, ubiquitinazione e funge sia da repressore che da attivatore.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli aminoacidi 1-280 del BCL6 umano (NP_001124317.1). Questa regione N-terminale include il dominio BTB/POZ critico per il reclutamento dei corepressori; si prevede che il riconoscimento del bersaglio sia specifico per la proteina a lunghezza intera.
• Per il Western blotting, potrebbe essere osservata una banda intorno a 79kDa (prevista); modificazioni post-traduzionali come acetilazione o fosforilazione potrebbero causare lievi spostamenti di mobilità. Si consiglia di utilizzare estratti nucleari da linee cellulari di cellule B del centro germinativo (es. Ramos, Daudi) come controlli positivi.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ci si aspetta una localizzazione nucleare. La colorazione simultanea con marcatori di cellule B (es. CD20) o marcatori del centro germinativo (es. BCL6 stesso, CD10) nei tessuti linfoide può aiutare a confermare la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato con il peptide sintetico o la proteina BCL6 ricombinante come antigene di cattura. Si raccomanda la titolazione e l'ottimizzazione delle condizioni di blocco.

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