Anticorpo monoclonale anti-HLA-DR biotinilato per citofluorimetria - P01903

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della catena alfa HLA-DR

• HLA-DRA codifica la catena alfa delle molecole MHC di classe II, che si associa alla catena beta (HLA-DRB) per formare eterodimeri HLA-DR funzionali sulla superficie cellulare.
• In complesso con HLA-DRB, presenta peptidi antigenici sulle cellule professionali presentanti l'antigene (APC), consentendone il riconoscimento da parte delle cellule T CD4+ e guidando funzioni effettrici dei linfociti T helper, come la risposta immunitaria mediata da anticorpi e l'attivazione dei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368
• Presenta tipicamente antigeni peptidici extracellulari composti da 10 a 30 amminoacidi, derivanti dalla proteolisi degli antigeni internalizzati negli endosomi e nei lisosomi. Riferimenti correlati: PMID:8145819
• Nel microambiente tumorale, presenta principalmente peptidi antigenici generati tramite la fagocitosi di cellule tumorali apoptotiche o la macropinocitosi di proteine tumorali secrete. Riferimenti correlati: PMID:31495665
• Presenta peptidi derivati da proteine intracellulari intrappolate negli autofagolisosomi dopo macroautofagia, un meccanismo particolarmente rilevante per la selezione delle cellule T nel timo e per la tolleranza immunitaria centrale. Riferimenti correlati: PMID:17182262, PMID:23783831
• La selezione degli epitopi immunodominanti segue due modalità di processamento: "prima il legame, poi il taglio/rifinitura" per i peptidi derivati da patogeni e "prima il taglio, poi il legame" per gli autoantigeni e i peptidi self, con un amminoacido ancora idrofobico di grandi dimensioni in posizione 1 del peptide, essenziale per l'interazione ad alta affinità con l'MHCII. Riferimenti correlati: PMID:25413013, PMID:8145819
• Si localizza nella membrana cellulare e nelle membrane dei compartimenti endocitici, inclusi endosomi precoci, endosomi tardivi, lisosomi e autofagolisosomi, in linea con il suo ruolo nel processamento e nella presentazione dell'antigene.
• È espresso nelle APC professionali, come macrofagi, cellule dendritiche e cellule B, nonché nelle cellule epiteliali timiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo monoclonale coniugato alla biotina è adatto per il rilevamento diretto mediante citofluorimetria dell'HLA-DR sulle APC umane e di macaco cinomolgo, senza la necessità di una coppia di anticorpi primario-secondario.
• Validare l'anticorpo nel proprio sistema campione specifico, poiché i livelli di espressione di HLA-DR possono variare in base al tipo cellulare, allo stato di attivazione e al contesto patologico.
• Per la citofluorimetria multiparametrica, assicurarsi che il fluoroforo coniugato alla streptavidina sia compatibile con gli altri fluorofori del pannello, così da evitare sovrapposizioni spettrali.
• Poiché l'immunogeno è una proteina ricombinante, l'anticorpo può riconoscere un epitopo conformazionale; tenerne conto quando si utilizzano tecniche denaturanti, come il Western blotting in condizioni riducenti.

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