Anticorpo monoclonale biotinilato anti-topo CD117/c-Kit per citometria a flusso - P05532

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD117/c-Kit

• Il recettore del fattore di crescita delle mastcellule/staminali Kit (CD117/c-Kit) è una tirosinoproteina chinasi transmembrana di tipo III codificata dal protooncogente Kit, che funge da recettore per la citochina KITLG/SCF.
• Dopo il legame con il ligando, Kit attiva molteplici vie di segnalazione a valle, tra cui le cascate PI3K/AKT, RAS/MAPK e JAK/STAT, per regolare la sopravvivenza, la proliferazione e la differenziazione cellulare.
• Kit svolge ruoli essenziali nell'ematopoiesi, nel mantenimento delle cellule staminali, nella gametogenesi, nello sviluppo, nella migrazione e nella funzione delle mastcellule, e nella melanogenesi.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme con distribuzioni tissutali distinte: l'isoforma 1 è espressa diffusamente, mentre l'isoforma 3 è arricchita nelle cellule staminali ematopoietiche.
• A livello subcellulare, Kit è localizzato principalmente sulla membrana cellulare, ma dopo l'attivazione subisce internalizzazione e si localizza nel citoplasma.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-linked e fosforilazione dipendente dal ligante su residui di tirosina chiave, fondamentali per l'attività chinasica e la propagazione del segnale.
• In quanto protooncogene, le mutazioni attivanti e l'espressione disregolata di KIT sono implicate in diverse neoplasie, sottolineando la sua importanza come bersaglio terapeutico.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il dominio extracellulare (amminoacidi 25–523) di CD117/c-Kit murino, quindi l'anticorpo è adatto per rilevare il recettore espresso in superficie nella citometria a flusso di cellule vive.
• Per la citometria a flusso, abbinare questo anticorpo primario biotinilato a un reagente secondario di streptavidina coniugato a un fluoroforo; titolare entrambi i reagenti per ottenere un indice di colorazione ottimale per il tuo tipo cellulare specifico.
• Includere controlli appropriati come un anticorpo biotinilato isotipo corrispondente e, se disponibile, cellule di topi knockout per Kit o un blocco con KITLG/SCF ricombinante per confermare la specificità.
• Se necessario, valutare la reattività crociata con l'uomo o altre specie, ma tenere presente che questo anticorpo è indicato per reagire con il topo; la validazione in altre specie è a carico dell'utilizzatore.
• Sebbene non elencate, l'anticorpo potrebbe funzionare in altre applicazioni come l'immunohistochimica o l'immunoprecipitazione; le prestazioni devono essere validate empiricamente nel sistema di campione pertinente.

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