Anticorpo monoclonale Biotina Coniugato Coniglio anti-Umano/Scimmia CD14 per FC - P08571

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD14

• L'antigene di differenziazione monocitaria CD14, noto anche come antigene My23 o glicoproteina ricca in leucina specifica delle cellule mieloidi, è espresso sui monociti, macrofagi e debolmente sui granulociti.
• CD14 agisce come corecettore per il lipopolisaccaride batterico (LPS), cooperando con LBP per consegnare LPS monomerico al complesso LY96/TLR4, mediando così le risposte immunitarie innate. Riferimenti correlati: PMID:1698311 PMID:23264655 PMID:20133493 PMID:22265692
• Il legame con LPS innesca una segnalazione dipendente da MyD88/TIRAP/TRAF6, portando all'attivazione di NF-κB, secrezione di citochine e risposta infiammatoria. Riferimenti correlati: PMID:8612135
• CD14 funge anche da corecettore per gli eterodimeri TLR2:TLR6 e TLR2:TLR1 in risposta rispettivamente a lipopeptidi diacilati e triacilati; questi complessi segnalano dalla superficie cellulare e sono successivamente indirizzati all'apparato di Golgi tramite una via dipendente dai lipid rafts. Riferimenti correlati: PMID:16880211
• Si lega alle LDL elettronegative (LDL(-)) e media il rilascio di citochine indotto da LDL(-). Riferimenti correlati: PMID:23880187
• La localizzazione subcellulare include membrana cellulare, forma secreta, membrane rafts e apparato di Golgi.
• Specificità tissutale: rilevato sui macrofagi (a livello proteico), espresso fortemente sui monociti, debolmente sui granulociti e sulla maggior parte dei macrofagi tissutali. Riferimenti correlati: PMID:1698311
• Caratteristiche strutturali: contiene ripetizioni ricche in leucina, è una glicoproteina ancorata a GPI con un peptide segnale e ha un peso molecolare previsto di circa 40 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Utilizzare l'anticorpo biotinilato per la rilevazione diretta in citometria a flusso del CD14 di superficie sui leucociti umani o di scimmia cinomolga; assicurare un adeguato blocco dei FcR per minimizzare il legame aspecifico.
• Validare i pattern di colorazione utilizzando appropriate popolazioni cellulari positive (es. monociti) e negative (es. linfociti); considerare l'uso di controlli isotipo.
• Il marcatore biotina consente una rilevazione flessibile con coniugati di streptavidina fluorescente; titolare il coniugato streptavidina per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Per la rilevazione intracellulare del CD14 nell'apparato di Golgi o nella via secretoria, è necessario un passaggio di permeabilizzazione; notare che l'applicazione primaria è la colorazione di superficie.
• Conservare l'anticorpo nelle condizioni di freddo raccomandate (spedizione in sacca di ghiaccio) e proteggerlo da esposizione prolungata alla luce per mantenere la stabilità del coniugato.

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