Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD28 di topo coniugato con biotina per citometria a flusso - P31041

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD28

• Il CD28 è una glicoproteina di superficie specifica delle cellule T che funge da recettore costimolatorio critico per l'attivazione, la proliferazione e la sopravvivenza delle cellule T, mantenendo così l'omeostasi immunitaria. Riferimenti correlati: PMID:7688139
• In seguito all'interazione con i suoi ligandi CD80 (B7-1) o CD86 (B7-2) sulle cellule presentanti l'antigene, il CD28 amplifica la segnalazione del recettore delle cellule T (TCR), portando a una maggiore produzione di citochine, in particolare interleuchina-2 (IL-2), sia nei subset di cellule T CD4+ che CD8+.
• Meccanisticamente, la legatura del CD28 recluta la proteina chinasi C-theta (PRKCQ) e GRB2, attivando il pathway NF-kappa-B attraverso cascate sia PI3K/Akt-dipendenti che indipendenti.
• In combinazione con la legatura TCR/CD3 e la costimolazione CD40L, il CD28 promuove la produzione di IL-4 e IL-10, modulando la differenziazione delle cellule T helper.
• Il CD28 è una glicoproteina di membrana di tipo I a passaggio singolo situata sulla membrana cellulare, caratterizzata da un dominio extracellulare simile alle immunoglobuline, una regione transmembrana e una coda citoplasmatica.
• La proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali come la glicosilazione e la fosforilazione, come dimostrato dalla sua classificazione come glicoproteina e fosfoproteina.
• Il CD28 appartiene alla superfamiglia delle immunoglobuline e contiene un legame disolfuro conservato all'interno del suo dominio extracellulare.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo biotinilato per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo di campione (es. splenociti di topo o linee cellulari T). Utilizzare un fluoroforo coniugato con streptavidina per la rilevazione.
• Includere anticorpi di controllo isotipico appropriati per valutare il legame aspecifico.
• Il CD28 è espresso sulla superficie cellulare delle cellule T; assicurarsi che la vitalità cellulare sia adeguata e bloccare i recettori Fc per ridurre al minimo il background.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nel proprio contesto sperimentale specifico e considerare l'utilizzo di controlli di stimolazione con PMA/ionomicina per verificare lo stato di attivazione delle cellule T.

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