Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD45 di topo coniugato con biotina per citometria a flusso - P06800

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CD45

• Il CD45 è una tirosina-proteina fosfatasi di tipo recettoriale C, essenziale per l'attivazione delle cellule T attraverso il recettore dell'antigene.
• Possiede due domini intracellulari con attività fosfatasica; il primo è enzimaticamente attivo, mentre il secondo regola la specificità per il substrato.
• Agisce come co-regolatore positivo della segnalazione delle cellule T in seguito al legame con DPP4 e alla defosforilazione di LYN, SKAP1 e FYN.
• Interagisce con CLEC10A nella sinapsi tra cellule presentanti l'antigene e cellule T, modulando la soglia di attivazione delle cellule T per limitare l'autoreattività.
• È localizzato sulla membrana cellulare, con arricchimento nei rafts di membrana e presso la sinapsi immunologica.
• È soggetto a splicing alternativo che genera molteplici isoforme (ad es. CD45R, B220) con composizioni distinte del dominio extracellulare.
• Parole chiave: glicoproteina, fosfoproteina, idrolasi, elica transmembrana, ripetizione, sinapsi.
• UniProt P06800, peso molecolare ~144,8 kDa.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo biotinilato per determinare la concentrazione di lavoro ottimale nel proprio sistema sperimentale, utilizzando controlli isotipici appropriati.
• Utilizzare un coniugato streptavidina-fluoroforo per la rilevazione; assicurarsi che il fluoroforo sia compatibile con la configurazione del citometro.
• Preparare sospensioni di cellule singole e bloccare i recettori Fc per ridurre al minimo il legame aspecifico.
• Poiché l'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 26-566), è probabile che l'anticorpo riconosca un epitopo extracellulare; i protocolli di fissazione/permeabilizzazione potrebbero non essere necessari, ma possono essere validati.

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