Anticorpo monoclonale coniugato a Biotina Coniglio anti-Mouse IgM per Citometria a Flusso - P01872

Specifiche e Parametri Nucleari del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della catena pesante costante mu delle immunoglobuline (IgM)

• La catena pesante costante mu delle immunoglobuline (IgM) è la regione costante della catena pesante mu, che forma i bracci leganti l'antigene degli anticorpi IgM. È codificata dal gene Ighm nel locus della catena pesante delle immunoglobuline.
• L'IgM secreta (sIgM) si polimerizza prevalentemente in pentameri, con occasionali esameri, consentendo un legame ad alta avidità con gli antigeni. Sia la sIgM naturale (polireattiva) che quella immunitaria (antigene-specifica) sono essenziali per risposte umorali efficaci, mediando il riconoscimento e la clearance dei patogeni tramite recettori Fc (es. FCMR) e l'attivazione del complemento (via classica C1q). Riferimenti correlati: PMID:10899913, PMID:11062505, PMID:28135254, PMID:34788614
• L'IgM legata alla membrana funge da componente recettoriale per l'antigene del complesso del recettore delle cellule B (BCR), fornendo un segnale tonico costitutivo per la sopravvivenza delle cellule B e mediando la segnalazione del pre-BCR che regola lo sviluppo delle cellule B e l'esclusione allelica.
• L'IgM si trova sia in forma secreta che sulla membrana cellulare. La sIgM viene trasportata attraverso l'epitelio mucoso tramite PIGR per l'immunità mucosale, mentre l'IgM di membrana è ancorata alle cellule B.
• Espressa specificamente nelle cellule del lignaggio B: precursori delle cellule B nel midollo osseo e cellule B-1 e B-2 mature.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-legata e legami disolfuro intercatena essenziali per la polimerizzazione e la stabilità strutturale. Lo splicing alternativo genera isoforme secrete e legate alla membrana, e la proteina contiene domini di tipo immunoglobulina, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo coniugato a biotina rileva l'IgM di topo nella citometria a flusso. Utilizzare un reagente secondario streptavidina-fluoroforo per l'amplificazione del segnale. Considerare di titolare sia l'anticorpo che il coniugato streptavidina per un indice di colorazione ottimale.
• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 105-454 dell'IgM di topo (regione costante), consentendo il riconoscimento sia delle forme secrete che di quelle legate alla membrana. Per la colorazione di superficie delle cellule B, utilizzare, ove possibile, cellule vive non fissate; la fissazione potrebbe alterare l'accessibilità dell'epitopo.
• Includere controlli isotipo appropriati e un blocco Fc per minimizzare il legame aspecifico. Non è stata segnalata reattività crociata con altre classi di immunoglobuline di topo, ma si raccomanda la validazione nel sistema campione rilevante.
• Per la colorazione intracellulare dell'IgM, è necessaria la permeabilizzazione; convalidare i protocolli di fissazione/permeabilizzazione per il tuo specifico tipo cellulare per preservare gli epitopi.

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