Anticorpo monoclonale di ratto anti-CD3 di topo biotinilato per FC - P04235 / P22646

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione delle catene CD3 delta ed epsilon

• CD3 delta (P04235) ed epsilon (P22646) sono subunità essenziali del complesso recettore delle cellule T (TCR)-CD3 sui linfociti T, che svolgono un ruolo centrale nell'immunità adattativa trasducendo i segnali di attivazione in seguito al riconoscimento dell'antigene.
• I domini citoplasmatici delle catene CD3 contengono motivi di attivazione basati sulla tirosina dell'immunorecettore (ITAM) che vengono fosforilati dalle chinasi della famiglia Src LCK e FYN dopo l'interazione con il TCR, avviando cascate di segnalazione a valle.
• Il CD3 delta è fondamentale per la differenziazione dei timociti: facilita il corretto assemblaggio intracellulare e l'espressione superficiale del complesso TCR-CD3, e la sua assenza interrompe lo sviluppo delle cellule T (PubMed:10935641). Riferimenti correlati: PMID:10935641
• Il CD3 delta interagisce con i corecettori CD4 e CD8, stabilendo così un legame funzionale tra il TCR e questi corecettori, necessario per l'attivazione e la selezione positiva delle cellule T CD4+ o CD8+.
• Sia il CD3 delta che l'epsilon sono proteine di membrana di tipo I a passaggio singolo con regioni extracellulari, transmembrana e citoplasmatiche; sono espressi sulla membrana plasmatica dei timociti e delle cellule T mature.
• Queste proteine sono modificate post-traduzionalmente mediante glicosilazione e fosforilazione e contengono ponti disolfuro conservati che ne stabilizzano la struttura.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Quando si esegue la citometria a flusso, titolare l'anticorpo biotinilato su un intervallo (ad esempio, 0,1–5 µg/mL) per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per la propria popolazione cellulare.
• Utilizzare un coniugato avidina/streptavidina-fluoroforo adatto per la rilevazione e includere un controllo IgG di ratto biotinilato con isotipo corrispondente per valutare il legame aspecifico.
• Per la colorazione superficiale di cellule T di topo vive, prendere in considerazione un breve passaggio di blocco con un bloccante del recettore Fc per ridurre il background e acquisire i dati prontamente dopo la colorazione per mantenere la vitalità.
• Convalidare l'anticorpo nel proprio ceppo di topo e contesto tissutale specifici, poiché l'espressione di CD3 può variare tra le sottopopolazioni di cellule T e gli stati di attivazione.

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