Anticorpo Policlonale di Coniglio BRD4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60885

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BRD4

• BRD4 è una proteina contenente bromodominio che funge da lettore della cromatina, riconoscendo e legandosi specificamente agli istoni acetilati per trasmettere la memoria epigenetica attraverso le divisioni cellulari e mantenere la struttura della cromatina di ordine superiore. Riferimenti correlati: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504 PMID:22334664 PMID:23589332

• Svolge un ruolo critico nella regolazione della trascrizione associandosi al complesso P-TEFb e reclutandolo sui promotori di geni indotti da segnale, promuovendo così l'elongazione dell'RNA polimerasi II. Riferimenti correlati: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• BRD4 si lega anche agli enhancer distali, dove collabora con JMJD6 per formare un complesso P-TEFb attivo spiazzando regolatori negativi come HEXIM1 e l'RNA sn 7SK. Riferimenti correlati: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• La proteina media direttamente o indirettamente la fosforilazione del dominio C-terminale (CTD) dell'RNA polimerasi II in serina-2, un passaggio chiave nell'elongazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:23086925 PMID:22509028

• Oltre agli istoni, BRD4 riconosce RELA acetilato, facilitando l'attivazione trascrizionale mediata da NF-kappa-B. Riferimenti correlati: PMID:19103749

• BRD4 viene anche reclutata sui promotori bersaglio di p53/TP53 dopo fosforilazione da CK2, agendo come regolatore della trascrizione dipendente da p53. Riferimenti correlati: PMID:23317504

• Nella risposta al danno al DNA, BRD4 agisce come isolante della cromatina reclutando il complesso condensina-2 sugli istoni acetilati, limitando così la diffusione della fosforilazione di H2AX.

• A livello subcellulare, BRD4 si localizza nel nucleo e nella cromatina; è espressa in modo ubiquitario nei tessuti, riflettendo il suo ruolo fondamentale nella biologia della cromatina e nella trascrizione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 700-794 della BRD4 umana) mira a una regione al di fuori dei bromodomini conservati, offrendo potenzialmente specificità per BRD4 rispetto ad altri membri della famiglia BET; tuttavia, la reattività incrociata dovrebbe essere confermata nel sistema sperimentale rilevante.
• Per applicazioni di Western blot, ci si aspetta di rilevare una banda intorno a 152 kDa; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e i tempi di esposizione per ottenere risultati chiari.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'immunoistochimica (IHC-P), è prevista una colorazione nucleare di BRD4; assicurarsi metodi di fissazione e recupero dell'antigene appropriati per preservare l'accessibilità dell'epitopo.
• Quando si utilizza questo anticorpo in ELISA, considerare l'uso del peptide immunogeno come controllo positivo e validare le prestazioni su diversi tipi di campione.

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