Calmegin Rabbit mAb per WB, IF-P, ELISA - O14967

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del Calmegin

• Il Calmegin (CLGN) è un chaperone molecolare specifico per i testicoli che appartiene alla famiglia della calreticolina/calnexina delle proteine del reticolo endoplasmatico (RE).
• Funziona durante la spermatogenesi assistendo il ripiegamento e il controllo della qualità delle proteine client essenziali per l'interazione spermatozoo-uovo, inclusa l'adesione e la penetrazione della zona pellucida.
• Il Calmegin è richiesto per la normale migrazione degli spermatozoi dall'utero all'ovidutto e per la fertilità maschile (per similarità).
• La proteina lega ioni calcio, una caratteristica critica per la sua attività di chaperone e la stabilità strutturale.
• Il Calmegin si localizza alla membrana del reticolo endoplasmatico, dove media il ripiegamento delle proteine tramite il suo dominio di tipo lectina.
• Le modifiche post-traduzionali del Calmegin includono acetilazione, fosforilazione e formazione di ponti disolfuro, che possono regolare la sua funzione e le sue interazioni.
• Lo splicing alternativo genera varianti di trascrizione multiple, potenzialmente producendo isoforme con proprietà funzionali distinte.
• In coerenza con il suo ruolo nella riproduzione, l'espressione del Calmegin è rilevata principalmente nei testicoli a livello proteico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 70 kDa; utilizzare lisati proteici derivati dai testicoli come controllo positivo, poiché l'espressione del Calmegin è limitata a questo tessuto.
• Quando si esegue l'immunofluorescenza (IF-P), includere passaggi di permeabilizzazione per consentire l'accesso dell'anticorpo al Calmegin localizzato sulla membrana del RE; validare la colorazione in sezioni testicolari o modelli cellulari che esprimono Calmegin endogeno o ricombinante.
• L'immunogeno copre il dominio luminale (aa 180–350), suggerendo la sua idoneità per rilevare sia le forme native che quelle denaturate; considerare l'accessibilità dell'epitopo in diverse condizioni di saggio.
• È riportata la reattività crociata con gli ortologhi di mouse e ratto; verificare l'omologia di sequenza e testare nei campioni testicolari delle specie appropriate se utilizzati in modelli non umani.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e le concentrazioni degli anticorpi utilizzando la proteina Calmegin ricombinante o frammenti peptidici.

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