Anticorpo policlonale di coniglio anti-Caspasi-10 per WB, ELISA - Q92851

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Caspasi-10

• La Caspasi-10 è una proteasi a cisteina appartenente alla famiglia delle caspasi, essenziale per l'esecuzione dell'apoptosi. È espressa nella maggior parte dei tessuti, con livelli inferiori rilevati nel cervello, nei reni, nella prostata, nei testicoli e nel colon.
• Funziona come caspasi iniziatrice nella via dei recettori della morte, reclutata ai recettori Fas e TNFR1 attraverso la proteina adattatrice FADD. Può inoltre partecipare all'apoptosi mediata dalla granzima B.
• Una volta attivata, la caspasi-10 scinde e attiva le caspasi effettrici a valle, tra cui CASP3, CASP4, CASP6, CASP7, CASP8 e CASP9, amplificando il segnale apoptotico.
• La proteasi idrolizza substrati tetrapeptidici come Tyr-Val-Ala-Asp-AMC e Asp-Glu-Val-Asp-AMC, caratteristica tipica delle caspasi.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme: l'isoforma 7 può potenziare l'attività di NF-kappaB inducendo solo una lieve apoptosi, mentre l'isoforma C è proteoliticamente inattiva.
• Le parole chiave associate alla caspasi-10 includono apoptosi, splicing alternativo, idrolasi, proteasi, tiol-proteasi, zimogeno e variante patologica (associata alla sindrome linfoproliferativa autoimmune di tipo II).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 220–521 della caspasi-10 umana, coprendo il grande dominio catalitico. In quanto anticorpo policlonale, può riconoscere sia la forma precursore (59 kDa) sia i frammenti processati; convalidare i pattern delle bande con controlli appropriati.
• Per il Western blot, prendere in considerazione l'uso di condizioni riducenti e titolare l'anticorpo per ridurre al minimo il legame aspecifico. A causa dello splicing alternativo, potrebbero essere rilevate potenziali isoforme.
• Questo anticorpo è adatto per ELISA; assicurarsi di utilizzare condizioni di rivestimento adeguate e un blocco appropriato per ridurre il background.
• La reattività crociata è limitata all'uomo; quando si lavora con altre specie, eseguire un esperimento pilota per confermare la reattività.
• La consistenza tra lotti può essere influenzata dall'immunizzazione degli animali; si raccomanda un controllo di qualità di routine con un lisato standard.

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