pAb di coniglio anti-Caspasi-8 - O89110

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Caspasi-8

• La Caspasi-8 è una caspasi iniziatrice chiave che attiva l'apoptosi estrinseca a valle dei recettori di morte FAS/CD95 e TNFRSF1A, attivando caspasi effettrici come CASP3 e CASP7. Riferimenti correlati: PMID:24813849 PMID:24813850 PMID:9654089
• In seguito al legame con il ligando, la Caspasi-8 viene reclutata tramite FADD nel complesso di segnalazione che induce la morte (DISC), dove subisce un processamento autolitico che genera il dimero attivo. Riferimenti correlati: PMID:29440439
• Scinde la proteina pro-apoptotica BID, collegando l'apoptosi estrinseca alla via mitocondriale mediante la promozione del rilascio del citocromo c. Riferimenti correlati: PMID:9727491 PMID:9727492
• La Caspasi-8 agisce come regolatore negativo critico della necroptosi scindendo RIPK1 in Asp-325, il che sopprime la sua attività chinasica e limita l'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:31511692
• Può anche avviare la piroptosi attraverso la scissione delle gasdermine C e D (GSDMC, GSDMD), soprattutto in seguito all'inattivazione di TAK1, portando alla formazione di pori nella membrana e al rilascio di citochine. Riferimenti correlati: PMID:30361383 PMID:30381458
• Nell'immunità innata, la Caspasi-8 modula le risposte inattivando N4BP1 a valle di TLR3 e TLR4, potenziando così la produzione di citochine. Riferimenti correlati: PMID:32971525
• A livello subcellulare, la Caspasi-8 si trova sia nel citoplasma sia nel nucleo.
• È ampiamente espressa, con livelli massimi nella milza, nel timo, nei polmoni, nel fegato e nei reni, e livelli inferiori nel cuore, nel cervello, nei testicoli e nei muscoli scheletrici.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende quasi l'intera lunghezza della Caspasi-8 murina (aa 4–480) e può potenzialmente riconoscere sia la proteina a lunghezza intera sia i frammenti processati. Si raccomanda la validazione nel modello cellulare o tissutale di interesse.
• Per il Western blot, utilizzare controlli positivi come lisati di milza o timo di topo e prevedere una banda principale intorno a 55 kDa; possono comparire anche prodotti di scissione indotti dall'attivazione.
• Nell'immunofluorescenza, prevedere una colorazione citoplasmatica e nucleare; includere controlli appropriati e validare la specificità nelle condizioni di fissazione/permeabilizzazione utilizzate.
• Questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come strumento di rilevazione nei formati ELISA; valutarne l'utilità per un ELISA sandwich se associato a uno specifico anticorpo di cattura.
• È necessario verificare la coerenza tra i diversi lotti e determinare empiricamente le diluizioni di lavoro ottimali per ciascuna applicazione.

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