pAb di coniglio contro CCL25 per WB, ELISA - O15444

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CCL25

• La CCL25, nota anche come TECK (Chemochina espressa nel timo), è una piccola citochina appartenente alla famiglia delle chemochine CC, che svolge un ruolo nel traffico delle cellule immunitarie.
• La proteina esiste in almeno due isoforme: l'isoforma 1 agisce come chemiotattico tramite CCR9, mentre l'isoforma 2 funziona come antagonista dell'isoforma 1, modulandone l'attività.
• La CCL25 è secreta principalmente e possiede attività chemiotattica verso timociti, macrofagi, cellule THP-1 e cellule dendritiche, ma è inattiva sui linfociti del sangue periferico e sui neutrofili.
• Si lega al recettore chemochinico atipico ACKR4, mediando il reclutamento della beta-arrestina (ARRB1/2) su ACKR4, suggerendo un coinvolgimento nella segnalazione chemochinica non classica.
• L'espressione è altamente specifica: la CCL25 si trova a livelli elevati nel timo e nell'intestino tenue, ed è espressa in particolare dalle cellule dendritiche timiche.
• La proteina è implicata nello sviluppo dei linfociti T e può contribuire alle risposte infiammatorie, coerentemente con le sue funzioni chemiotattiche e citochiniche.
• Le caratteristiche post-traduzionali includono un peptide segnale e legami disolfuro, caratteristici delle chemochine secrete, ed è stata identificata in studi di proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 24-150 della CCL25 umana, coprendo la proteina secreta matura; questo design può favorire la rilevazione sia dell'isoforma 1 sia dell'isoforma 2 se condividono la sequenza.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e non riducenti, poiché i legami disolfuro possono influenzare la migrazione; la dimensione prevista è di 17 kDa, ma le modifiche post-traduzionali possono causare lievi spostamenti.
• L'anticorpo è prodotto in coniglio e può richiedere reagenti di rilevazione secondari anti-coniglio appropriati; convalidarlo nel sistema di campioni pertinente (ad es. lisati di tessuto di timo o intestino tenue).
• Nell'ELISA, utilizzare la CCL25 ricombinante come controllo positivo e ottimizzare le concentrazioni di rivestimento; se si esegue il multiplexing, escludere la reattività crociata con altre chemochine.

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