CCR7 pAb di coniglio - P47774

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CCR7

• Codificato dal gene Ccr7, il recettore tipo 7 per le chemochine C-C (noto anche come EBI1, CD197 o recettore MIP-3 beta) è una proteina transmembrana a più passaggi appartenente alla famiglia dei recettori accoppiati a proteine G (GPCR).
• CCR7 funziona come recettore ad alta affinità per la chemochina MIP-3-beta/CCL19, svolgendo un ruolo fondamentale nell'indirizzare il traffico delle cellule immunitarie verso gli organi linfoidi secondari.
• Strutturalmente, CCR7 presenta le caratteristiche conservate tipiche dei recettori chemochinici, tra cui un N-terminale extracellulare, sette eliche transmembrana e un C-terminale intracellulare.
• Localizzato principalmente sulla membrana cellulare, CCR7 è espresso in vari sottogruppi di linfociti e cellule dendritiche, dove media l'homing omeostatico e infiammatorio.
• Le modifiche post-traduzionali chiave, come la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, sono fondamentali per la stabilità del recettore, il legame con il ligando e la capacità di segnalazione.
• Oltre all'homing linfocitario, la segnalazione di CCR7 influenza lo sviluppo dei timociti, la migrazione delle cellule T regolatorie e l'instaurazione della tolleranza immunitaria.
• Nel contesto patologico, CCR7 è implicato nella metastasi tumorale e nelle condizioni infiammatorie croniche, rendendolo un bersaglio di interesse per applicazioni terapeutiche e diagnostiche.
• Il peso molecolare calcolato della proteina è di circa 43 kDa, in linea con la banda osservata nel western blotting.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno usato per generare questo anticorpo è un peptide sintetico che copre i residui 211–310 del dominio C-terminale intracellulare della CCR7 di topo (NP_031745.2). Si prevede che questa regione sia meno conservata tra le specie, il che può contribuire alla reattività con la CCR7 di ratto.
• Per il western blotting (WB), si consiglia di utilizzare lisati di tessuti linfoidi (es. milza, linfonodi) o linee cellulari note per esprimere CCR7 (es. cellule di timoma di topo EL4). Le fasi di recupero dell'antigene o di arricchimento possono migliorare la rilevazione a causa della bassa espressione endogena.
• La dimensione della banda osservata (~43 kDa) può spostarsi per effetto della glicosilazione o di altre modifiche; l'aggiunta di enzimi deglicosilanti può aiutare a convalidare la specificità.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale anti-CCR7 può migliorare la specificità del saggio. Convalidare la concentrazione di lavoro ottimale mediante titolazione a scacchiera nella matrice del tuo campione.
• Come per qualsiasi reagente policlonale, è necessario verificare la coerenza tra lotti e si possono prendere in considerazioni fasi di adsorbimento incrociato per ridurre al minimo il legame non specifico con altri recettori chemochinici.

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