Anticorpo monoclonale CD11b Rabbit PolymAb® per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P11215 / P05555

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ITGAM (CD11b)

• ITGAM codifica per l'integrina alfa-M (CD11b), un recettore transmembrana che si accoppia con l'integrina beta-2 (CD18) per formare il complesso Mac-1 (CR3), una molecola di adesione chiave nell'immunità innata.
• Agisce come recettore per il complemento legando il frammento iC3b di C3, mediando la fagocitosi dei patogeni opsonizzati dal complemento (PubMed:20008295, PubMed:9558116). Riferimenti correlati: PMID:20008295 PMID:9558116
• Media l'adesione dei neutrofili alle cellule endoteliali stimolate tramite interazione con ICAM1, facilitando l'extravasazione e la migrazione dei leucociti (PubMed:1980124). Riferimenti correlati: PMID:1980124
• È necessario, insieme a CD18, per l'attivazione dei neutrofili primati con TNF mediata da CD177-PRTN3, amplificando le risposte infiammatorie (PubMed:21193407). Riferimenti correlati: PMID:21193407
• Regola la migrazione dei neutrofili e contribuisce alla difesa immunitaria innata (PubMed:28807980). Riferimenti correlati: PMID:28807980
• Subcellularmente si localizza sulla membrana cellulare e nelle zolle lipidiche di membrana, dove interagisce con molecole di segnalazione.
• È espresso prevalentemente in monociti, granulociti e neutrofili, in linea con la sua funzione limitata alla linea mieloide.
• Subisce splicing alternativo e un'estesa N-glicosilazione; contiene molte ripetizioni di legame per calcio e magnesio, essenziali per l'attività.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai 1–100 amminoacidi N-terminal di CD11b umano; il legame dell'anticorpo potrebbe essere influenzato se l'epitopo si trova in questa regione o se modifiche post-traduzionali alterano l'accessibilità.
• Per il Western blotting (WB) in condizioni riducenti, è attesa una banda di circa 127 kDa; si consiglia l'uso di un marcatore ad alto peso molecolare e un tempo di trasferimento proteico adeguato.
• Durante l'analisi IHC-P, testare diversi metodi di recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato, pH 6,0) e diverse diluizioni dell'anticorpo primario per ottimizzare i segnali specifici nucleari e di membrana.
• Nelle applicazioni IF/ICC, considerare protocolli di permeabilizzazione cellulare e metodi di fissazione che preservino l'integrità dell'antigene di membrana; verificare che la localizzazione corrisponda alla colorazione prevista sulla membrana plasmatica.
• L'anticorpo reagisce in modo incrociato con CD11b di topo e ratto; tuttavia, validare sempre nel sistema di campioni corrispondente per garantire la specificità.
• Per ELISA, questo anticorpo può essere valutato come anticorpo di cattura in accoppiamenti sandwich che bersagliano CD11b; valutare le prestazioni con standard di proteine ricombinanti.

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