Anticorpo policlonale di coniglio anti-CD146/MCAM per WB e ELISA - P43121

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD146/MCAM

• CD146, noto anche come MCAM, MUC18 e MelCAM, è una glicoproteina della superficie cellulare codificata dal gene MCAM nell'uomo.
• Funziona come molecola di adesione coinvolta nella coesione del monostrato endoteliale a livello delle giunzioni intercellulari, svolgendo un ruolo cruciale nell'integrità dei tessuti vascolari.
• L'espressione di CD146 sulle cellule di melanoma facilita l'interazione con gli elementi vascolari, promuovendo la disseminazione tumorale per via ematogena e la metastasi.
• Durante lo sviluppo embrionale, CD146 può agire come molecola di adesione nelle cellule della cresta neurale, supportandone la migrazione.
• In qualità di recettore, CD146 induce la fosforilazione della tirosina delle chinasi FYN e FAK1 e provoca un aumento transitorio della concentrazione del calcio intracellulare.
• La proteina è localizzata nella membrana e viene rilevata prevalentemente nelle cellule endoteliali e nella muscolatura liscia vascolare dei tessuti adulti normali; la sua espressione aumentata è associata alla progressione del melanoma maligno.
• CD146 contiene domini extracellulari simili alle immunoglobuline, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica, e subisce modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione, fosforilazione e formazione di ponti disolfuro.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 447-646, situati nella regione extracellulare di CD146; questa regione è conservata nell'uomo e nel ratto, a supporto della reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, si prevede una banda a circa 72 kDa (peso molecolare previsto di circa 71,6 kDa), sebbene la glicosilazione possa causare lievi variazioni; validare la banda con controlli positivi appropriati, come lisati di cellule endoteliali o di melanoma.
• Nelle applicazioni ELISA, è possibile utilizzare il rivestimento diretto con CD146 ricombinante o lisati cellulari; titolare l'anticorpo e includere reagenti secondari di rilevazione appropriati.
• Essendo un anticorpo policlonale, è possibile una variabilità tra diversi lotti; si consiglia di includere in ogni esperimento un controllo positivo noto o una curva standard per garantire la riproducibilità.

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