mAb di coniglio anti-CD43 per WB, IF/ICC, ELISA - P16150

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD43

• La leucosialina (CD43, SPN) è la principale sialoproteina della superficie cellulare dei leucociti, fortemente glicosilata ed espressa in molteplici isoforme.
• Regola l'attivazione e la differenziazione delle cellule T: inibisce la differenziazione Th2 e promuove l'espressione di IFN-gamma da parte delle cellule T, inducendo l'espressione dei recettori delle citochine IFNGR e IL4R e mediando il loro raggruppamento con il TCR (PubMed:18036228; PubMed:24328034). Riferimenti correlati: PMID:18036228 PMID:24328034
• Agisce come principale ligando della E-selectina, responsabile del rolling delle cellule Th17 sul sistema vascolare attivato e del loro reclutamento durante l'infiammazione, mediando l'adesione specifica delle cellule Th17 alla E-selectina (per similitudine).
• Protegge le cellule dai segnali apoptotici, promuovendo la sopravvivenza cellulare.
• È localizzata nella membrana plasmatica, nei microvilli, nell'uropodio ed è inoltre presente nel nucleo e nei corpi PML.
• È espressa specificamente sulla superficie cellulare dei timociti, dei linfociti T, dei neutrofili, delle plasmacellule e dei mielomi.
• È soggetta a estese modificazioni post-traduzionali, tra cui glicosilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, come evidenziato dal suo peso molecolare apparente più elevato su SDS-PAGE.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blot, si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali ottenuti da linee cellulari leucocitarie umane (ad es. Jurkat), considerando il peso previsto di 40 kDa; verificare il pattern delle bande a causa della forte glicosilazione e della variabilità delle isoforme.
• Nell'IF/ICC, permeabilizzare le cellule per rilevare sia le frazioni di membrana sia le potenziali frazioni nucleari; effettuare una co-colorazione con marcatori degli organelli per convalidare la localizzazione.
• Per l'ELISA, valutare la reattività verso la proteina CD43 ricombinante o un peptide che copra la regione dell'immunogeno, per confermare la specificità nel sistema di analisi utilizzato.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nel sistema di campioni e nell'applicazione di interesse; essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, è prevista un'elevata specificità, ma è sempre necessario titolare l'anticorpo e includere controlli positivi/negativi.

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