Anticorpo monoclonale di coniglio contro CDK4 per WB, IHC-P, ELISA - P11802

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDK4

• CDK4 è una serina/treonina chinasi che forma complessi attivi ciclina D-CDK4, che fosforilano le proteine della famiglia del retinoblastoma (RB), inclusa RB1, regolando la transizione del ciclo cellulare G1/S.
• La fosforilazione di RB1 da parte della ciclina D-CDK4 porta alla dissociazione dei fattori di trascrizione E2F, consentendo la trascrizione dei geni necessari per l'ingresso nella fase S.
• I complessi ciclina D-CDK4 integrano i segnali mitogenici e antimitogenici per controllare la proliferazione cellulare.
• CDK4 fosforila anche SMAD3 in modo dipendente dal ciclo cellulare, reprimendo la sua attività trascrizionale.
• La proteina si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana nucleare; la traslocazione nucleare è facilitata dal complesso ternario ciclina D/CDK4/CDKN1B.
• CDK4 subisce acetilazione e fosforilazione, ed è una chinasi che lega l'ATP; lo splicing alternativo genera più isoforme e le mutazioni sono collegate a vari tipi di cancro.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (a.a. 200-303) della proteina CDK4 umana, che è probabilmente conservata, supportando la reattività crociata riportata con topo e ratto.
• Per il Western blotting, aspettarsi una banda vicino a 34 kDa; convalidare la rilevazione in linee cellulari in proliferazione e utilizzare appropriati controlli di caricamento.
• Nell'immunistochimica, le condizioni di recupero dell'antigene possono essere ottimizzate; si può osservare colorazione nucleare e/o citoplasmatica a seconda dello stadio del ciclo cellulare.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento con altri anticorpi contro CDK4 può migliorare le prestazioni del test.

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