Anticorpo policlonale di coniglio anti-CDK4 [validato KO] per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P11802

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDK4

• La chinasi ciclina-dipendente 4 (CDK4) è una Ser/Thr-protein chinasi che forma complessi attivi con le cicline di tipo D, regolando principalmente la transizione del ciclo cellulare da G1 a S.
• CDK4 fosforila la proteina del retinoblastoma (RB1), determinando la dissociazione e l'attivazione dei fattori di trascrizione E2F, che promuovono l'espressione dei geni necessari per l'ingresso nella fase S.
• Ipofosforila RB1 nella fase iniziale G1 e funge da principale integratore delle vie di segnalazione mitogeniche e anti-mitogeniche.
• Inoltre, CDK4 fosforila SMAD3 in modo dipendente dal ciclo cellulare, reprimendone l'attività trascrizionale.
• La traslocazione nucleare e la piena attività del complesso ciclina D-CDK4 richiedono l'assemblaggio in un complesso ternario con CDKN1B (p27Kip1).
• La localizzazione subcellulare comprende citoplasma, nucleo e membrana nucleare.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione; lo splicing alternativo produce isoforme distinte.
• CDK4 è implicata in diverse malattie attraverso varianti con guadagno di funzione ed è un componente del proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato a partire da un peptide sintetico comprendente gli amminoacidi 204-303 del CDK4 umano. Questa regione si trova all'interno del dominio C-terminale e può contribuire alla specificità dell'anticorpo.
• Per il Western blot (WB), si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali ottenuti da linee cellulari umane, murine o di ratto in proliferazione. Il CDK4 endogeno migra a ~34 kDa; l'anticorpo rileva la proteina a lunghezza intera.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), possono essere necessarie fasi di recupero antigenico e permeabilizzazione. Convalidare sempre il pattern di colorazione in un tessuto o sistema cellulare pertinente.
• L'anticorpo è idoneo per l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA, come indicato; gli utilizzatori devono ottimizzare le condizioni e confermare i risultati mediante controlli paralleli.

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