Anticorpo policlonale di coniglio anti-CDK5RAP3 per WB ed ELISA - Q96JB5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDK5RAP3

• La proteina 3 associata alla subunità regolatoria di CDK5 (CDK5RAP3), nota anche come C53, IC53, LZAP, HSF-27, MST016, PP1553 o OK/SW-cl.114, è una proteina adattatrice multifunzionale codificata dal gene CDK5RAP3.
• Agisce come adattatore di substrato dei complessi della ligasi E3 che mediano l'ufmilazione, ovvero l'attacco covalente del modificatore simile all'ubiquitina UFM1 alle proteine bersaglio, ed è coinvolta in processi fondamentali quali il riciclo dei ribosomi e la reticolofagia (ER-fagia).
  Riferimenti correlati: PMID:23152784, PMID:30635284, PMID:32851973, PMID:37595036
• All'interno del complesso UREL associato ai ribosomi, CDK5RAP3 promuove la mono-ufmilazione della proteina ribosomiale 60S RPL26/uL24 in corrispondenza di Lys-134, indebolendo l'interazione tra le subunità 60S post-terminazione e i trasloconi SEC61, facilitando così il rilascio e il riciclo delle subunità ribosomiali maggiori dalla membrana del reticolo endoplasmatico.
  Riferimenti correlati: PMID:38383785, PMID:38383789, PMID:36121123
• CDK5RAP3 svolge inoltre una funzione nella regolazione trascrizionale controllando negativamente la trascrizione genica mediata da NF-kappa-B attraverso la modulazione della fosforilazione di RELA, e svolge un ruolo nella transizione mitotica G2/M e nei checkpoint del danno al DNA.
  Riferimenti correlati: PMID:17785205, PMID:20228063, PMID:15790566, PMID:19223857
• Attraverso l'interazione con CDKN2A/ARF e MDM2, CDK5RAP3 può indurre l'ubiquitinazione, la stabilizzazione e l'attivazione di p53/TP53, promuovendo così l'arresto del ciclo cellulare in G1 e inibendo la proliferazione cellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:16173922
• La proteina è localizzata nella membrana del reticolo endoplasmatico, nel citoplasma, nel nucleo e nel centrosoma/citoscheletro, ed è espressa ubiquitariamente nei tessuti, inclusi cuore, cervello, placenta, polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene e pancreas; l'isoforma 3 mostra espressione nel rene, nel fegato, nel muscolo scheletrico e nella placenta.
  Riferimenti correlati: PMID:10721722, PMID:12054757, PMID:12737517
• Tra le funzioni aggiuntive rientrano il potenziale coinvolgimento nella rottura dell'involucro nucleare durante l'apoptosi e la regolazione dell'attività di MAPK14 attraverso la modulazione della sua defosforilazione da parte di PPM1D/WIP1.
  Riferimenti correlati: PMID:23478299, PMID:21283629
• Nel contesto delle infezioni microbiche, CDK5RAP3 può essere regolata negativamente da una forma mutante della proteina dell'involucro grande del virus dell'epatite B (pre-s2), favorendo l'ingresso in mitosi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blot, l'anticorpo può rilevare una banda intorno a 57 kDa corrispondente alla CDK5RAP3 a lunghezza completa; si consiglia di utilizzare lisati di controllo positivo umano appropriati (ad esempio, provenienti da linee cellulari o tessuti noti per esprimere CDK5RAP3) e controlli negativi per confermare la specificità.
• Essendo un anticorpo policlonale prodotto contro la regione N-terminale comprendente gli amminoacidi 1-300 della CDK5RAP3 umana, non è possibile escludere la reattività crociata con varianti di splicing o paraloghi contenenti questa regione; si raccomanda la validazione nel sistema sperimentale pertinente.
• L'anticorpo è raccomandato per WB ed ELISA secondo l'elenco delle applicazioni del produttore; per altre tecniche, come IHC o IF, la fattibilità e le condizioni operative ottimali devono essere determinate empiricamente.
• Dato il coinvolgimento di CDK5RAP3 nell'ufmilazione e nella regolazione del ciclo cellulare, si consiglia di considerare analisi dei complessi o esperimenti di co-immunoprecipitazione con partner di legame pertinenti qualora l'obiettivo della ricerca si estenda a questi pathway.
• Conservare l'anticorpo come raccomandato al ricevimento (spedito in sacchetti refrigeranti); evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento per mantenere le prestazioni.

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