Anticorpo policlonale di coniglio anti-CDK9 per WB ed ELISA - P50750

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDK9

• CDK9 è una serina/treonina-protein chinasi che forma la subunità catalitica del complesso del fattore b di elongazione trascrizionale positivo (P-TEFb) con la ciclina T. Questo complesso è essenziale per l'elongazione della trascrizione da parte della RNA polimerasi II. Riferimenti correlati: PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967

• P-TEFb fosforila il dominio C-terminale della RNA polimerasi II (POLR2A), nonché i fattori di elongazione negativi DSIF e NELF, riducendone gli effetti inibitori sulla trascrizione. Fosforila inoltre fattori di trascrizione quali EP300, MYOD1 e AR. Riferimenti correlati: PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:12037670

• CDK9 modula una complessa rete di modificazioni della cromatina, tra cui la monoubiquitinazione dell'istone H2B (H2Bub1), la trimetilazione di H3K4 (H3K4me3) e H3K36me3, integrando la trascrizione con la processazione cotrascrizionale dell'mRNA degli istoni. Riferimenti correlati: PMID:15564463, PMID:19575011, PMID:19844166

• CDK9 fosforila l'istone H1.4 in Ser-187, un marcatore associato all'attivazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:28539972

• La chinasi svolge un ruolo nella risposta allo stress replicativo e nel mantenimento dell'integrità genomica attraverso il complesso CDK9/ciclina-K, favorendo il recupero del ciclo cellulare dall'arresto della replicazione e limitando i danni al DNA. Riferimenti correlati: PMID:20493174

• A livello subcellulare, CDK9 si trova nel nucleo, nei corpi PML e nel citoplasma, ed è espressa ubiquitariamente nei tessuti umani.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 153-372 della CDK9 umana, una regione conservata nell'uomo, nel topo e nel ratto, a supporto della reattività crociata riportata. Si consiglia di verificare le prestazioni in sistemi di campioni specifici per specie.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 43 kDa. Utilizzare lisati di controllo positivo appropriati, ad esempio HeLa e Jurkat, e convalidare la specificità della banda mediante controlli con knockdown o peptidi bloccanti.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può rilevare sia la CDK9 nativa sia quella ricombinante. Ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento ed eseguire esperimenti di titolazione per stabilire le diluizioni operative.
• Considerare il modello di espressione ubiquitario di CDK9 nella selezione dei controlli negativi e nell'interpretazione dei risultati.

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