Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Citrullina-Istone H3 (Citrullinazione R8) (Q16695/P68431) per WB, DB, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3

L'Istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma, responsabile dell'avvolgimento e della compattazione del DNA in cromatina. Questo ruolo strutturale è cruciale per regolare l'accessibilità del DNA e controlla quindi processi fondamentali come la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione e la stabilità cromosomica. Gli istoni, incluso H3, sono soggetti a una complessa serie di modifiche post-traduzionali – spesso definite "codice istonico" – che modulano dinamicamente la struttura della cromatina e l'espressione genica.

Questo anticorpo rileva specificamente la citrullinazione all'arginina 8 (R8) dell'Istone H3. La citrullinazione, la conversione dell'arginina in citrullina, è mediata dalle peptidilarginina deiminasi (PAD) ed è implicata nella regolazione genica, nella NETosi e nelle malattie autoimmuni. È noto che l'Istone H3 venga citrullinato su più residui, tra cui R3, R8, R17 e R26, e queste modifiche possono influenzare la compattazione della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:16567635.

Le due accessioni SWISS-PROT coperte da questo anticorpo, Q16695 (Istone H3.1t) e P68431 (Istone H3.1), rappresentano varianti istoniche distinte. Q16695 è una variante H3 specifica del testicolo espressa nelle cellule testicolari, mentre P68431 corrisponde all'Istone H3.1 canonico dipendente dalla replicazione, che è ubiquitariamente espresso. Entrambi si localizzano nel nucleo e nel cromosoma.

L'Istone H3 è ampiamente modificato sulla sua coda N-terminale, con modifiche come acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione e molti altri segni. Queste modifiche sono regolate dinamicamente e fungono da piattaforme di legame per complessi che modificano la cromatina, governando così l'identità cellulare e la risposta agli stimoli ambientali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di 10–20 µg di lisato cellulare totale per corsia. Validare l'anticorpo nel sistema campione rilevante (ad es., cellule stimolate con citrullinazione indotta) e includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Per il dot blot (DB) e l'ELISA, ottimizzare la concentrazione di antigeni per il rivestimento e le condizioni del tampone per garantire il rilevamento specifico dell'Istone H3 citrullinato. Un peptide sintetico citrullinato intorno a R8 può fungere da controllo positivo.
• Poiché la citrullinazione può essere transitoria e dipendente da enzimi, la preparazione del campione deve preservare le modifiche post-traduzionali; considerare l'uso di inibitori delle PAD o la lisi immediata con appropriati inibitori di fosfatasi/proteasi.
• Questo anticorpo monoclonale di coniglio può essere utilizzato per studiare la dinamica della citrullinazione in vari tipi di campioni umani; la reattività crociata con altre specie è prevista su ampia gamma, ma gli utenti finali dovrebbero verificarla nei loro specifici modelli sperimentali.

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