Cleaved Gasdermin D (C-Terminale) Rabbit mAb - Q9D8T2

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Gasdermina-D

• La gasdermina-D (Gsdmd) è il precursore di una proteina formante pori cruciale per la piroptosi, una morte cellulare lítica pro-infiammatoria. Dopo la clivaggio da parte delle caspasi infiammatorie (CASP1, CASP4/CASP11) seguente l'attivazione dell'infammasoma, il frammento N-terminale oligomerizza in pori della membrana di diametro 10–15 nm, permettendo il rilascio di IL-1β e IL-18. Riferimenti correlati: PMID:26375003, PMID:26375259, PMID:26611636, PMID:27383986, PMID:29195811, PMID:29274245
• Il poro della gasdermina-D può formarsi anche sulle membrane mitocondriali, rilasciando il DNA mitocondriale nel citosol, e può uccidere direttamente batteri extracellulari legandosi alla cardiolipina batterica e ai fosfoinositidi. Riferimenti correlati: PMID:27383986, PMID:37001519
• Oltre alla piroptosi, la gasdermina-D ha una funzione di co-attivatore della trascrizione: nell'intestino tenue superiore, il clivaggio da parte di CASP3/CASP7 genera un frammento N-terminale che transloca nel nucleo, servendo da co-attivatore per STAT1 per indurre CIITA e MHC di classe II, mantenendo così la tolleranza alimentare. Riferimenti correlati: PMID:37327784
• La localizzazione subcellulare è dinamica: la gasdermina-D si trova nel citoplasma, nei complessi dell'infammasoma, nella membrana plasmatica, nella membrana mitocondriale, nel nucleo, ed è secreta extracellularmente dopo la formazione dei pori.
• Le modificazioni post-traduzionali includono palmitoilazione, fosforilazione, ubiquitinazione e glicosilazione; la proteina contiene anche legami isopeptidici e β-strand transmembrana.
• Specificità tissutale: altamente espressa nelle cellule endoteliali cerebrali del mouse, collegando la gasdermina-D all'integrità della barriera emato-encefalica e ai processi neuroinfiammatori.
• Clivaggio indotto da allergeni: l'allergene papaina può clivare la gasdermina-D per formare pori N-terminali che rilasciano specificamente l'interleuchina-33 (IL-33), guidando le risposte immunitarie di tipo 2. Riferimenti correlati: PMID:35749514, PMID:35794369

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• A causa del design dell'immunogeno (residui C-terminali 277–376), questo anticorpo potrebbe rilevare sia la gasdermina-D a lunghezza intera (~53 kDa) sia il frammento di clivaggio C-terminale (~22 kDa) nel Western blot. Validare i pattern di clivaggio utilizzando macrofagi di topo stimolati con LPS/ATP o inibitori della caspasi-1/11.
• Per l'immunoprecipitazione, considerare l'utilizzo dell'anticorpo per arricchire la gasdermina-D a lunghezza intera o il suo frammento C-terminale; ottimizzare le condizioni di lisi e lavaggio per preservare le interazioni proteiche.
• Nelle applicazioni ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un anticorpo di rilevamento specifico per l'N-terminale potrebbe permettere la discriminazione tra la gasdermina-D a lunghezza intera e quella clivata.

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