Anticorpo policlonale rabbit Cleaved PARP1 p25 per WB e ELISA - P09874

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Cleaved PARP1 p25

• PARP1 (Poly [ADP-ribosio] polimerasi 1) è un enzima nucleare che media la poli-ADP-ribosilazione (PARilazione) delle proteine bersaglio, svolgendo un ruolo centrale nella riparazione del danno al DNA riconoscendo le rotture del filamento e reclutando il macchinario di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Dopo la clivaggio da parte di caspasi-3/7 durante l'apoptosi, PARP1 viene clivata in un frammento N-terminale di 25 kDa (p25) e un frammento C-terminale di 89 kDa; il frammento p25 promuove l'apoptosi mediata da AIFM1 e si lega irreversibilmente alle rotture del DNA, interferendo con la riparazione del DNA e aumentando la morte cellulare. Riferimenti correlati: PMID:33168626
• PARP1 è localizzata principalmente nel nucleo, nel nucleolo e nei cromosomi, ma può traslocare nel citoplasma durante l'apoptosi; contiene più domini a dita di zinco per il legame con il DNA e un dominio di auto-poli-ADP-ribosilazione.
• Come enzima chiave per la riparazione del DNA, PARP1 catalizza l'ADP-ribosilazione di serina, glutammato e altri amminoacidi su istoni e proteine di riparazione, facilitando il rilassamento della cromatina e il reclutamento dei fattori di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:19764761, PMID:25043379, PMID:28190768, PMID:33186521, PMID:34874266
• PARP1 funziona anche nella regolazione della trascrizione, agendo sia come repressore (modulando la struttura della cromatina) sia come regolatore positivo/negativo dell'allungamento della trascrizione, ed è coinvolta nella progressione della forcella di replicazione. Riferimenti correlati: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539, PMID:33412112
• PARP1 è implicata nell'immunità innata regolando negativamente la via cGAS-STING attraverso la PARilazione citosolica di cGAS. Riferimenti correlati: PMID:32315358, PMID:32844745, PMID:35460603
• Le modifiche post-traduzionali di PARP1 includono acetilazione, fosforilazione, ubiquitinazione e un'estesa auto-poli-ADP-ribosilazione, che regolano la sua attività e le sue interazioni.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 201–300) del frammento p25 di PARP1 umano clivato. Nel WB, assicurarsi di preparare il campione in condizioni apoptotiche per generare il prodotto di clivaggio p25; considerare l'uso di controlli positivi come cellule trattate con staurosporina.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevamento per misurare specificamente i livelli di PARP1 clivata; convalidare la sensibilità e la specificità della rilevazione con proteina ricombinante p25 o saggi di competizione peptidica.
• La reattività crociata è riportata per l'uomo; se necessario, testare in altre specie poiché l'omologia della sequenza può variare.

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