Anticorpo policlonale rabbit CTCF per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - P49711

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CTCF

• CTCF (Repressore trascrizionale CTCF), indicato anche come proteina a 11 dita di zinco e fattore di legame CCCTC, è un fattore di legame alla cromatina espresso ubiquitariamente che è assente negli spermatociti primari.
• Si lega a sequenze specifiche di DNA e regola l'architettura tridimensionale della cromatina formando anelli e ancorando il DNA alla lamina nucleare, organizzando così il genoma.
  Riferimenti correlati: PMID:16949368, PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• CTCF definisce i confini tra DNA attivo ed eterocromatico legandosi agli isolatori di cromatina, bloccando così interazioni inappropriate tra enhancer e promotori.
  Riferimenti correlati: PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• Svolge un ruolo critico nell'espressione allele-specifica nel locus genico imprintito IGF2/H19, dove il legame sull'allele materno stabilisce una conformazione della cromatina che limita l'accesso dell'enancer a IGF2.
  Riferimenti correlati: PMID:16107875, PMID:16815976, PMID:17827499
• CTCF lega preferenzialmente il DNA non metilato, contribuendo a mantenere le zone prive di metilazione, mentre la sua legame è inibito dalla metilazione CpG.
  Riferimenti correlati: PMID:18413740
• Funge da regolatore trascrizionale doppio: reprime MYC e BAG1, mentre attiva il gene APP.
  Riferimenti correlati: PMID:8649389, PMID:9591631, PMID:9407128
• CTCF è coinvolto nella coesione dei cromatidi fratelli e si localizza ai centromeri durante la mitosi, dove recluta CENPE nelle regioni pericentromeriche.
  Riferimenti correlati: PMID:12191639, PMID:18550811, PMID:26321640
• È considerato un soppressore tumorale ed è essenziale per lo sviluppo embrionale precoce, regolando la trascrizione negli ovociti e negli embrioni preimpianto.
  Riferimenti correlati: PMID:12191639

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende la regione N-terminale (amminoacidi 1–260) di CTCF umano, che può migliorare l'accessibilità alla proteina nativa nei saggi di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP).
• Per il Western blotting è prevista una banda predominante corrispondente al peso molecolare calcolato di ~83 kDa; tuttavia, le modifiche post-traduzionali possono generare bande aggiuntive. Si consiglia di convalidare dimensione e specificità nel sistema di campioni di interesse.
• Data la reattività crociata riportata con uomo, topo e ratto, gli utenti devono confermare le prestazioni dell'anticorpo nella loro specie e tipo di tessuto specifici, poiché i livelli di espressione possono variare.
• Nell'immunofluorescenza, CTCF mostra localizzazione nucleare con possibile arricchimento ai centromeri; è necessario ottimizzare condizioni appropriate di fissazione e permeabilizzazione per ogni linea cellulare.
• Quando si utilizza questo anticorpo policlonale per IP o ELISA, si consiglia di includere controlli di isotipo appropriati e testare un intervallo di diluizioni dell'anticorpo a causa della variabilità tra lotti.

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