Anticorpo monoclonale di topo anti-CYP7A1 per WB, ELISA - P22680

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CYP7A1

• Il citocromo P450 7A1 (CYP7A1), noto anche come colesterolo 7-alfa-monoossigenasi o CYP7, è un enzima epatico chiave che avvia la via classica della biosintesi degli acidi biliari.
• Catalizza l'idrossilazione 7-alfa del colesterolo, la fase limitante nella conversione del colesterolo in acidi biliari primari, regolando così l'omeostasi del colesterolo. Riferimenti correlati: PMID:12077124, PMID:19965590, PMID:2384150
• Idrossila inoltre ossisteroli quali 4beta-idrossicolesterolo e 24-idrossicolesterolo, contribuendo alla sintesi alternativa degli acidi biliari e al metabolismo degli ossisteroli. Riferimenti correlati: PMID:11013305, PMID:12077124
• Funziona come monoossigenasi che utilizza ossigeno molecolare e NADPH attraverso la reduttasi del citocromo P450 per incorporare un atomo di ossigeno nel substrato, riducendo il secondo ad acqua. Riferimenti correlati: PMID:11013305, PMID:12077124, PMID:19965590
• Ossida il doppio legame 7,8 del 7-deidrocolesterolo e del lathosterolo, generando prevalentemente derivati 7-cheto e ampliando il suo ruolo nel metabolismo degli steroli. Riferimenti correlati: PMID:21813643
• È localizzato nella membrana del reticolo endoplasmatico e nella membrana microsomiale, in accordo con la sua funzione di citocromo P450 legato alla membrana.
• Contiene un cofattore costituito da ferro eme, necessario per la sua attività catalitica, ed è caratterizzato da una struttura conservata del citocromo P450.
• È espresso principalmente nel fegato, come rilevato dall'analisi specifica dei tessuti, in linea con il suo ruolo nel catabolismo epatico del colesterolo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione N-terminale (aa 86-108) che può essere conservata tra le specie, in accordo con la reattività crociata osservata con CYP7A1 di topo e ratto.
• Per il Western blot, si prevede una banda specifica a circa 58 kDa. Validare utilizzando controlli positivi e negativi appropriati, come lisati di fegato umano.
• Le applicazioni ELISA possono trarre beneficio dall'uso della proteina CYP7A1 ricombinante come standard quantitativo; le condizioni del saggio devono essere ottimizzate empiricamente.
• Poiché l'espressione di CYP7A1 è specifica del fegato, la preparazione dei campioni deve tenere conto dell'origine tissutale; si raccomandano estratti di fegato come controllo positivo.

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