Anticorpo monoclonale coniglio Citocromo c - P99999

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Citocromo c

• Il Citocromo c è una piccola proteina eme (peso molecolare ~11,7–12 kDa) codificata dal gene CYCS nell'uomo. È un vettore di elettroni altamente conservato, essenziale per la funzione mitocondriale e l'apoptosi.
• Come componente della catena di trasporto degli elettroni, il Citocromo c trasporta elettroni tra il Complesso III (citocromo c reduttasi) e il Complesso IV (citocromo c ossidasi) all'interno dello spazio intermembrana mitocondriale.
• Oltre al suo ruolo respiratorio, il Citocromo c è un mediatore critico dell'apoptosi. Il rilascio del Citocromo c dai mitocondri nel citosol innesca l'assemblaggio dell'apoptosoma, attivando la caspasi-9 e avviando la cascata delle caspasi che porta alla morte cellulare.
• Sotto normali condizioni fisiologiche, la proteina si localizza principalmente nello spazio intermembrana mitocondriale. A seguito di stimoli apoptotici, viene rilasciata nel citoplasma attraverso meccanismi che coinvolgono le proteine della famiglia Bcl-2 e la permeabilizzazione della membrana mitocondriale esterna.
• Le modifiche post-traduzionali, inclusa l'acetilazione e la fosforilazione, regolano la conformazione e la funzione del Citocromo c, influenzando sia l'efficienza del trasporto di elettroni sia la sua attività pro-apoptotica.
• Le parole chiave associate al Citocromo c includono: struttura 3D, apoptosi, trasporto di elettroni, eme, ferro, legame dei metalli, mitocondrio, fosfoproteina e catena respiratoria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la proteina matura del Citocromo c a lunghezza intera (aminoacidi 1–105), che dovrebbe supportare il riconoscimento della conformazione nativa in più specie grazie all'alta conservazione della sequenza.
• Per il Western blot (WB), considerare sia condizioni riducenti che non riducenti, poiché il rilascio della proteina dai mitocondri e l'attacco dell'eme possono influenzare la migrazione; validare l'anticorpo in lisati cellulari rilevanti (es. frazione citosolica vs. mitocondriale).
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), si raccomandano metodi di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e una diluizione ottimizzata dell'anticorpo per tessuti inclusi in paraffina e fissati in formalina, per rilevare la localizzazione mitocondriale o citosolica del Citocromo c.
• Per l'ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo monoclonale con un secondo anticorpo mirato a un epitopo distinto potrebbe consentire il rilevamento tramite ELISA a sandwich; validare la coppia in campioni spike o matrici biologiche rilevanti per la ricerca sull'apoptosi.

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