mAb coniglio anti-DHFR per WB, ELISA - P00374

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della DHFR

• La DHFR (Dihydrofolate reduttasi) è un enzima chiave nel metabolismo del folato, che catalizza la riduzione dipendente da NADPH del 7,8-diidrofolato a 5,6,7,8-tetraidrofolato: questo passaggio è essenziale per la sintesi de novo di timidilato, glicina e purine, nonché per la produzione di precursori del DNA. Riferimenti correlati: PMID:12096917 PMID:15039552 PMID:17569517 PMID:21876188 PMID:22235121
• Legge il proprio mRNA e quello di DHFR2, suggerendo un meccanismo di autoregolazione nel metabolismo del folato.
• La DHFR si localizza nel mitocondrio, nel citoplasma e nel nucleo, riflettendo i suoi ruoli multifunzionali in diversi compartimenti cellulari.
• La proteina è ampiamente espressa nei tessuti fetali e adulti, con un'espressione particolarmente più elevata nel cervello adulto rispetto a quello fetale.
• L'alternativa splicing e i polimorfismi del gene DHFR sono collegati alla resistenza al metotrexato, un aspetto fondamentale nella chemioterapia antitumorale.
• Appartiene alla famiglia delle diidrofolato reduttasi; funziona come ossidoreduttasi e proteina legante l'RNA.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione centrale (aa 88–187) della DHFR umana; questa sequenza è ampiamente conservata nel topo e nel ratto, e supporta la reattività incrociata osservata.
• Per Western blot, aspettarsi una banda vicino a 21 kDa; utilizzare controlli positivi e negativi appropriati per il tipo di campione per confermare la specificità.
• Nelle applicazioni ELISA, si consiglia di abbinare questo anticorpo con un anticorpo di cattura che bersaglia un epitopo diverso per lo sviluppo del formato sandwich.
• L'espressione della DHFR può essere modulata da farmaci antifolati come il metotrexato; tenere conto di possibili fluttuazioni nel vostro sistema sperimentale.

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