Anticorpo Policlonale di Coniglio Dimethyl-eEF1A-K55 (P68104/Q05639) per WB ed ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eEF1A

• eEF1A (fattore di allungamento eucariotico 1A) esiste in due isoforme, eEF1A1 (gene EEF1A1, GeneID: 1915) ed eEF1A2 (gene EEF1A2, GeneID: 1917), entrambi fattori di allungamento della traduzione altamente conservati. Catalizzano il legame GTP-dipendente dell'amminoacil-tRNA al sito A ribosomiale durante l'allungamento della sintesi proteica PMID:26593721, PMID:26651998, PMID:36123449, PMID:36264623, PMID:36638793.
• Oltre alla traduzione, eEF1A1 promuove il bundling dell'actina per l'organizzazione del citoscheletro e, nelle cellule T-helper 1, forma un complesso con TXK e PARP1 per regolare positivamente la trascrizione di IFNG PMID:17177976. EEF1A1 è anche richiesto per la traduzione delle proteine virali durante l'infezione da SARS-CoV-2 PMID:33495306.
• EEF1A1 è ampiamente espresso, mentre EEF1A2 si trova prevalentemente nel cervello, nel cuore e nel muscolo scheletrico. A livello subcellulare, EEF1A1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nel nucleolo e nella membrana cellulare; EEF1A2 si localizza nella membrana del reticolo endoplasmatico PMID:19158340, PMID:8650580, PMID:26497934, PMID:36697828.
• La lisina 55 (K55) è un sito di dimetilazione conservato (N6,N6-dimetillisina) sia in eEF1A1 che in eEF1A2, come identificato dalla proteomica PMID:30143613, PMID:30612740. In eEF1A2, K55 può anche essere trimetilata. Queste modifiche possono regolare le interazioni proteiche e la fedeltà della traduzione.
• Le mutazioni in EEF1A2 sono associate a disturbi del neurosviluppo come epilessia e disabilità intellettiva, sottolineando l'importanza biomedica della regolazione di eEF1A2.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un peptide K55 dimetilato di eEF1A; dovrebbe riconoscere specificamente la forma dimetil-K55. Confermare la specificità mediante competizione con peptide (dimetilato vs. non modificato) o trattando i campioni con una demetilasi.
• Per il WB, eEF1A1 (~50.1 kDa) ed eEF1A2 (~50.5 kDa) migrano a ~50 kDa. Utilizzare condizioni standard di SDS-PAGE e trasferimento. Validare in linee cellulari umane (es., HeLa per EEF1A1, SH-SY5Y per EEF1A2).
• Nell'ELISA, rivestire con peptide dimetilato o lisato cellulare; includere controlli non metilati per valutare la reattività crociata.
• Data la funzione di eEF1A nella traduzione, nella biologia del cancro e nella replicazione virale, questo anticorpo può supportare studi sulla regolazione dipendente dalla metilazione in varie condizioni fisiologiche e patologiche.

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