Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-DiMetil-Istone H3-K4 (Q16695/P68431) per Ricerca in ChIP, WB ed Epigenetica

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3 (DiMetil-K4)

• L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, l'unità fondamentale della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H2B e H4, impacchetta il DNA, regolando l'accesso per la trascrizione, la replicazione, la riparazione e la stabilità cromosomica.
  Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

• L'istone H3 si localizza nel nucleo e nei cromosomi.
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• Esistono molteplici varianti dell'istone H3. La variante H3.1 dipendente dalla replicazione (es., codificata dai geni H3C1–H3C12) è ampiamente espressa, mentre la variante H3.1t (H3-4/HIST3H3) mostra un'espressione specifica per il testicolo, indicando un ruolo specializzato nell'organizzazione della cromatina durante la spermatogenesi.
  Riferimenti correlati: UniProt Q16695

• La coda N-terminale dell'istone H3 è soggetta a estese modificazioni post-traduzionali (PTM), tra cui metilazione, acetilazione, fosforilazione, citrullinazione e altre. Queste modifiche formano un "codice istonico" che influenza l'architettura della cromatina e l'attività genica.
  Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

• La dimetilazione sulla lisina 4 (H3K4me2) è un marcatore epigenetico ben caratterizzato associato a promotori genici attivi e in attesa, nonché a regioni enhancer. Questo anticorpo monoclonale di coniglio è stato generato contro un peptide sintetico dimetilato in K4 e consente il rilevamento specifico di H3K4me2 in vari saggi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Considerare la validazione della specificità per la dimetil-K4 mediante saggi di competizione con peptidi o confrontando i segnali con anticorpi diretti contro altre modificazioni di H3.
• Per ChIP, ChIP-seq e CUT&Tag, ottimizzare la reticolazione, la frammentazione della cromatina e la quantità di anticorpo per il particolare tipo cellulare o tessuto in uso.
• L'ampia reattività incrociata predetta (Umano, Topo, Ratto, Altro) suggerisce un epitopo conservato; tuttavia, confermare la reattività nella specie di interesse prima di studi su larga scala.
• Utilizzare inibitori di proteasi e fosfatasi durante l'estrazione del campione per preservare le modificazioni istoniche labili.
• Il peso molecolare calcolato dell'istone H3 è di circa 15 kDa; regolare di conseguenza la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento per il Western blotting.

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