Anticorpo policlonale di coniglio DiMetil-Istone H3 (K79) (Q16695/P68431) per WB, ELISA, ChIP

Specifiche e parametri principali del prodotto

Informazioni biologiche: Funzione e localizzazione dell'istone H3

• L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge compatta il DNA nella cromatina. Questa regolazione dell'accessibilità al DNA è fondamentale per la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione del DNA e la stabilità cromosomica. Riferimenti correlati: UniProt Q16695

• La proteina si localizza nel nucleo e sui cromosomi, dove forma la struttura portante della cromatina. Riferimenti correlati: UniProt P68431

• L'istone H3 subisce estese modifiche post-traduzionali, inclusa la metilazione su molteplici residui di lisina. La di-metilazione sulla Lisina 79 (H3K79me2) è un marcatore epigenetico specifico implicato nella regolazione genica e nell'organizzazione della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:16267050 PMID:17194708

• La variante H3.1t (Q16695) è espressa prevalentemente nelle cellule testicolari, mentre la variante canonica H3.1 (P68431) è ubiquitaria. Riferimenti correlati: UniProt Q16695

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico dimetilato intorno alla posizione K79; si consiglia di convalidare la specificità per la modificazione tramite saggi di competizione peptidica o analisi dot blot.
• Per Western blot è attesa una banda intorno ai 15 kDa. Utilizzare protocolli di estrazione nucleare o estrazione acida per arricchire gli istoni e ottenere una rilevazione ottimale.
• Nei saggi ChIP, ottimizzare le condizioni di reticolazione e sonicazione per preservare le interazioni tra H3K79me2 e cromatina. Includere appropriati controlli positivi (es. promotori di geni attivi) e negativi (regioni eterocromatiche).
• Per ELISA, rivestire le piastre con il peptide dimetilato o nucleosomi purificati; verificare il legame dell'anticorpo con controlli di peptide metilato rispetto a peptide non modificato.
• La reattività crociata è prevista per un ampio spettro di specie; tuttavia, è consigliabile convalidarla nel vostro specifico sistema di campioni.

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