Anticorpo policlonale di coniglio DiMethyl-Histone H3-K9 (Q16695/P68431) per la ricerca epigenetica | WB, ChIP, IF/ICC

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

L'istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina, regolando così l'accessibilità del DNA per processi come la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione e la stabilità cromosomica. La modificazione dinamica post-traduzionale degli istoni, tra cui metilazione, acetilazione e fosforilazione, costituisce il "codice istonico" che governa la struttura e la funzione della cromatina.

La metilazione sulla lisina 9 dell'istone H3 (H3K9; corrispondente alla posizione 10 nella voce UniProt P68431 includendo la metionina iniziale) è un marcatore epigenetico critico. La dimetilazione in questo sito (H3K9me2) è catalizzata da diverse metiltransferasi ed è generalmente associata alla repressione trascrizionale e alla formazione di eterocromatina. Sia l'istone canonico H3.1 (P68431) sia la variante H3.1t specifica del testicolo (Q16695) contengono questo residuo di lisina, che è soggetto a diversi tipi di modificazioni, tra cui di- e tri-metilazione. Riferimenti correlati: PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050

L'istone H3 è localizzato principalmente nel nucleo ed è un componente strutturale dei cromosomi. Mentre H3.1 è espresso ubiquitariamente nelle cellule in replicazione, H3.1t mostra specificità tissutale e si trova prevalentemente nelle cellule testicolari, riflettendo il suo ruolo nell'organizzazione della cromatina durante la spermatogenesi. Riferimenti correlati: PMID:16567635

Il ripiegamento simile all'immunoglobulina dell'istone H3, insieme agli altri istoni core, facilita la formazione della particella centrale del nucleosoma, fornendo una piattaforma stabile per l'assemblaggio della cromatina di ordine superiore. I pattern di modificazione post-traduzionale su H3, inclusa la dimetilazione in K9, sono regolati dinamicamente durante il ciclo cellulare e lo sviluppo, influenzando i profili di espressione genica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1-100 dell'istone H3 umano. Quando si utilizza l'anticorpo in applicazioni come Western blotting (WB) o immunoistochimica (IHC), si consiglia di verificare la specificità con saggi di competizione peptidica o utilizzando campioni di controllo positivo e negativo ben caratterizzati.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) e il ChIP-seq, la reattività dell'anticorpo con l'H3K9 dimetilato (H3K9me2) può essere sfruttata per mappare i domini di cromatina repressiva. Assicurarsi che le condizioni di reticolazione e sonicazione siano ottimizzate per il tuo tipo di cellula.
• In WB, il peso molecolare atteso dell'istone H3 è di circa 15 kDa. Dovrebbe essere osservata una banda chiara a questa dimensione; bande aggiuntive possono indicare un legame non specifico, quindi si consiglia di ottimizzare la diluizione.
• Questo anticorpo ha una reattività incrociata ampia prevista in base alla conservazione della sequenza, ma raccomandiamo di convalidare la reattività nella tua specie e tipo di campione specifico, specialmente per organismi non mammiferi.

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