ECE1 Rabbit pAb - P42892

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ECE1

• ECE1 è una metalloproteasi di zinco legata alla membrana che catalizza la conversione della big endothelin-1 nel potente peptide vasocostrittore endothelin-1.
• Appartiene alla famiglia M13 delle metalloproteasi e presenta caratteristiche strutturali tra cui un legame disolfuro, siti di glicosilazione e molteplici siti di fosforilazione.
• Lo splicing alternativo genera diverse isoforme (A, B, C, D) che condividono il dominio catalitico, ma differiscono nelle sequenze N-terminali e nella distribuzione tissutale.
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare mediante una singola elica transmembrana con funzione di ancora-segnale, con il dominio catalitico rivolto verso lo spazio extracellulare/luminale.
• ECE1 è ampiamente espressa; livelli elevati sono rilevati nelle cellule endoteliali, nella placenta, nei polmoni, nel cuore e nella ghiandola surrenale, con distribuzioni specifiche per isoforma nel fegato, nei reni, nei testicoli e nelle cellule muscolari lisce.
• Le mutazioni di ECE1 sono associate alla malattia di Hirschsprung, un disturbo dello sviluppo del sistema nervoso enterico, evidenziandone il ruolo oltre la regolazione vascolare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 670-770) di ECE1 umano, che include parte del dominio catalitico e può riconoscere più isoforme.
• Per il Western blot, aspettarsi una banda di circa 87 kDa in condizioni riducenti; si consiglia di utilizzare inibitori delle proteasi freschi e di evitare l'ebollizione per preservare gli epitopi.
• Nelle applicazioni IHC-P e IF/ICC, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione tenendo conto della localizzazione membranaria di ECE1; il recupero antigenico enzimatico può migliorare il rilevamento.
• Per i test ELISA, il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o con un peptide correlato può fungere da controllo positivo; si raccomandano test di preassorbimento per confermare la specificità.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con ECE1 di topo e ratto, ma le prestazioni devono essere validate nel tessuto o nella linea cellulare di interesse prima di effettuare studi quantitativi.

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