eEF2 Rabbit mAb - P13639

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di eEF2

• Catalizza la fase di traslocazione ribosomiale dipendente dal GTP durante l’elongazione della traduzione. Durante questa fase, il ribosoma passa dallo stato pre-traslocazionale (PRE) a quello post-traslocazionale (POST), mentre il peptidil-tRNA appena formato e legato al sito A e il tRNA deacilato legato al sito P si spostano rispettivamente nei siti P ed E, accompagnati dal movimento dell’mRNA e da cambiamenti conformazionali nel ribosoma. Riferimenti correlati: PMID:26593721
• eEF2 è una proteina di 95 kDa altamente conservata, legante il GTP e appartenente alla famiglia dei fattori di elongazione-G, essenziale per la biosintesi proteica.
• Si localizza principalmente nel citoplasma, dove svolge la sua funzione canonica, ma viene rilevata anche nel nucleo, suggerendo ruoli extra-traduzionali.
• Le modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, ADP-ribosilazione, metilazione e coniugazione con molecole simili all’ubiquitina, regolano l’attività e la stabilità di eEF2 in risposta ai segnali cellulari.
• Le mutazioni nel gene EEF2 causano l’atassia spinocerebellare di tipo 26 (SCA26), una malattia neurodegenerativa caratterizzata da una progressiva incoordinazione motoria.
• Gli studi strutturali rivelano domini conservati di legame ai nucleotidi e conformazioni dinamiche fondamentali per il legame al ribosoma e la traslocazione.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L’immunogeno è diretto contro la regione C-terminale (aa 759-858), il che può facilitare il rilevamento di eEF2 a lunghezza completa e di eventuali prodotti di scissione; verificare la dimensione della banda, pari a circa 95 kDa, in lisati rappresentativi.
• Per il Western blotting, utilizzare un gel SDS-PAGE standard (ad es. 8-10%) e una membrana in PVDF o nitrocellulosa; prendere in considerazione l’ottimizzazione delle condizioni di blocco (ad es. 5% di latte scremato in polvere o BSA) per ridurre il background.
• Nell’IHC-P e nell’IF/ICC, può essere necessario il recupero antigenico (tampone citrato o EDTA) e la permeabilizzazione; testare i protocolli di fissazione (formaldeide rispetto a metanolo) per bilanciare la conservazione della morfologia e l’accessibilità dell’epitopo.
• Le prestazioni dell’ELISA dipendono dal formato del test; in quanto anticorpo monoclonale, può essere utilizzato come reagente di rilevamento o di cattura; validare la linearità e la sensibilità utilizzando eEF2 ricombinante o lisati cellulari.
• La reattività crociata con topo e ratto consente la ricerca traslazionale in comuni organismi modello; confermare la specificità mediante controlli con knockdown tramite siRNA o knockout nel proprio sistema sperimentale.

CamelBio: il tuo ponte di approvvigionamento tutto-in-uno

CamelBio offre ai produttori di diagnostica e ai laboratori di ricerca una soluzione di approvvigionamento semplificata e da un’unica fonte per materie prime IVD di alta qualità, comprese coppie di anticorpi validate e anticorpi ricombinanti ottimizzati come questo anticorpo monoclonale anti-eEF2. Per i test che hanno come bersaglio l’elongazione della traduzione o la neurodegenerazione associata a eEF2, forniamo reagenti ancillari sfusi, sviluppo personalizzato di anticorpi e approvvigionamento di target rari per accelerare lo sviluppo dei vostri kit. La nostra rigorosa gestione della catena di fornitura e il supporto tecnico garantiscono prestazioni costanti e scalabili, dal concept alla clinica.