Anticorpo Policlonale di Coniglio per Recettore EGF (Specifico per Delezione E746-A750) per WB, ELISA - P00533

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Recettore EGF (EGFR)

• L'EGFR è un recettore tirosin-chinasico che lega multipli ligandi della famiglia EGF (es. EGF, TGFA, AREG, epigen, BTC, EREG, HBEGF). Il legame del ligando innesca l'omo-/eterodimerizzazione, l'autofosforilazione e l'attivazione di vie di segnalazione a valle tra cui RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STATs e NF‑kappa‑B. Questo anticorpo è specifico per il mutante con delezione E746‑A750, comunemente riscontrato nel carcinoma polmonare non a piccole cellule. Riferimenti correlati: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• L'isoforma 2 di EGFR può agire come antagonista dell'azione dell'EGF, mentre l'isoforma canonica 1 è il principale recettore di segnalazione.
• L'EGFR è localizzato sulla membrana cellulare, ma risiede anche nel reticolo endoplasmatico, nell'apparato di Golgi, nel nucleo, negli endosomi e può essere secreto.
• La proteina è ampiamente modificata post‑traduzionalmente, inclusa fosforilazione, glicosilazione, idrossilazione, palmitoilazione, metilazione e ubiquitinazione, che ne regolano l'attività e il traffico.
• È ubiquitariamente espresso, con l'isoforma 2 presente anche nei tumori ovarici.
• L'EGFR funge anche da recettore cellulare ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV), mediando la formazione del complesso CD81-CLDN1 e la fusione di membrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che comprende la delezione E746-A750, indicando che l'anticorpo è progettato per riconoscere selettivamente l'epitopo mutante. Gli sperimentatori dovrebbero confermare la specificità utilizzando cellule che esprimono EGFR wild‑type come controllo negativo.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati proteici da linee cellulari di cancro umano note per ospitare la mutazione EGFR E746‑A750del (es. HCC827, H1975) o proteina EGFR mutante ricombinante.
• Per l'ELISA, si consiglia di rivestire con proteina EGFR ricombinante E746‑A750del. Riconoscere che può verificarsi reattività crociata con EGFR wild‑type; sono necessari un bloccaggio appropriato e un'ottimizzazione della diluizione.
• Le concentrazioni di lavoro ottimali per WB ed ELISA dovrebbero essere determinate empiricamente; le diluizioni iniziali tipiche per anticorpi policlonali vanno da 1:500 a 1:2000.

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