EGFR Rabbit pAb per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'EGFR

• EGFR è un recettore tirosin-chinasico che lega i ligandi della famiglia EGF (ad es. EGF, TGFA, AREG, BTC, epiregulina, HBEGF) per regolare la proliferazione, la sopravvivenza e la differenziazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• Il legame del ligando induce la dimerizzazione e l'autofosforilazione del recettore, attivando cascate a valle tra cui le vie RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K/AKT, PLCγ/PKC, STAT e NF-κB. Riferimenti correlati: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR fosforila anche substrati non recettoriali come RGS16 (modulando la segnalazione delle proteine G) e MUC1 (potenziando le interazioni SRC/β-catenina). Riferimenti correlati: PMID:11602604, PMID:11483589
• Il recettore è localizzato prevalentemente nella membrana cellulare, ma viene trasportato anche verso gli endosomi, l'apparato di Golgi, il reticolo endoplasmatico e il nucleo, consentendo una segnalazione regolata spazialmente.
• Molteplici modifiche post-traduzionali (fosforilazione, ubiquitinazione, idrossilazione, metilazione, palmitoilazione) regolano finemente l'attività, la stabilità e la distribuzione subcellulare dell'EGFR.
• È espresso ubiquitariamente nei tessuti normali; l'isoforma 2 sottoposta a splicing alternativo viene rilevata in modo significativo nei tumori ovarici e può funzionare come antagonista dell'EGF.
• Oltre ai ligandi endogeni, EGFR funge da recettore ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV), facilitando l'internalizzazione virale.
• Riconosciuto come proto-oncogene, la disregolazione dell'EGFR (sovraespressione o mutazioni attivanti) favorisce numerosi tumori, rendendolo un bersaglio terapeutico centrale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 1021–1210) si trova all'interno del dominio citoplasmatico, conservato nelle comuni condizioni denaturanti; per il Western blotting, si consiglia di utilizzare la lisi RIPA standard e SDS-PAGE riducente con linee cellulari positive (ad es. A431, HeLa) e negative appropriate.
• Per IHC-P, i protocolli di recupero antigenico (ad es. tampone citrato a pH 6,0 o Tris-EDTA a pH 9,0) possono richiedere un'ottimizzazione, poiché EGFR è una glicoproteina transmembrana spesso fortemente N-glicosilata.
• Sebbene sia riportata reattività crociata con uomo, topo e ratto, si raccomanda di verificare la reattività specie-specifica e la specificità del segnale nel proprio sistema sperimentale, in particolare quando si utilizzano modelli geneticamente modificati.
• A causa dell'elevato peso molecolare (~134 kDa), per il Western blotting utilizzare gel SDS-PAGE all'8% o a gradiente e ottimizzare le condizioni di trasferimento (ad es. trasferimento umido overnight o semisecco con bassa concentrazione di metanolo).
• Negli esperimenti di immunoprecipitazione (IP), il pre-clearing dei lisati e l'utilizzo di un controllo isotipico IgG di coniglio possono contribuire a ridurre il legame aspecifico.
• Durante lo sviluppo di un ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale di cattura può migliorare la sensibilità del test; eseguire titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali.

CamelBio: il vostro partner unico per l'approvvigionamento

CamelBio è un partner completo per l'approvvigionamento da un'unica fonte, al servizio dei produttori di diagnostici e dei laboratori di ricerca, e fornisce materie prime IVD affidabili, tra cui anticorpi, antigeni e reagenti accessori. Questo EGFR Rabbit pAb supporta la ricerca in oncologia e nella trasduzione del segnale; inoltre, lo integriamo con coppie di anticorpi validate, anticorpi monoclonali/policlonali ottimizzati, reagenti sfusi e approvvigionamento personalizzato per target rari e difficili. Dall'idea alla clinica, CamelBio semplifica il vostro processo di approvvigionamento per accelerare lo sviluppo diagnostico.