Anticorpo policlonale coniglio EGFR per WB, IP, ELISA - P00533

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'EGFR

• EGFR è un recettore tirosin chinasi e membro della famiglia ErbB (ErbB-1/HER1). Il gene EGFR codifica per più isoforme; l'isoforma 2 può agire come antagonista dell'azione dell'EGF.
• Legame del ligando: EGFR si lega a ligandi della famiglia EGF, inclusi EGF, TGF-alfa, AREG, epigen, BTC, epiregulina e HBEGF, innescando la omodimerizzazione ed eterodimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• EGFR attivato recluta proteine adattatrici e segnala attraverso le principali cascate: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STATs, e potenzialmente NF-kappa-B (PubMed:27153536, PubMed:11116146). Riferimenti correlati: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR fosforila direttamente altre proteine, come RGS16 (PubMed:11602604) e MUC1 (PubMed:11483589), collegandosi alla segnalazione dei recettori accoppiati a proteine G e alle vie della beta-catenina. Riferimenti correlati: PMID:11602604, PMID:11483589
• Regola la migrazione cellulare tramite l'interazione con CCDC88A/GIV (PubMed:20462955) e svolge ruoli nell'apprendimento, nella memoria e nella segnalazione del dolore (Per analogia). Riferimenti correlati: PMID:20462955
• Localizzazione subcellulare: membrana cellulare, membrana del reticolo endoplasmatico, membrana dell'apparato di Golgi, membrana nucleare, membrana endosomiale, endosoma, nucleo, e anche secreto.
• Espresso ubiquitariamente; l'isoforma 2 è espressa anche nei tumori ovarici.
• Agisce come recettore per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV), mediando l'infezione degli epatociti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C-terminale (aa 1100–1200) dell'EGFR umano; ci si aspetta che l'anticorpo riconosca l'EGFR a lunghezza intera e potenzialmente le principali isoforme.
• Per il Western blotting, utilizzare un controllo positivo come il lisato cellulare A431; il peso molecolare previsto è ~134 kDa, ma la glicoproteina può migrare a un peso superiore a causa di modifiche post-traduzionali.
• Considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare lo stato di fosforilazione, poiché l'EGFR è pesantemente fosforilato dopo l'attivazione.
• Per l'immunoprecipitazione, validare il coniugato anticorpo-perla e ottimizzare le condizioni di lavaggio per ridurre il rumore di fondo.
• La cross-reattività con topo e ratto è stata dimostrata; tuttavia, consigliamo di verificare la reattività nel modello sperimentale specifico.
• Dato che questo è un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti (batch-to-batch) dovrebbe essere valutata per applicazioni quantitative critiche.

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