Anticorpo monoclonale di coniglio anti-eIF4A1 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P60842

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di eIF4A1

• eIF4A1 è un'elicasi dell'RNA ATP-dipendente e un componente fondamentale del complesso di inizio della traduzione eIF4F; riconosce la struttura del cappuccio dell'mRNA e facilita il legame del ribosoma.
• Disfa le strutture secondarie dell'RNA nella 5'-UTR degli mRNA, consentendo un'efficiente scansione da parte della piccola subunità ribosomiale alla ricerca del codone di inizio e promuovendo così l'inizio della traduzione dipendente dal cappuccio. Riferimenti correlati: PMID:20156963
• Attraverso la sua attività elicasica, eIF4A1 promuove la proliferazione e la crescita cellulare, agendo come regolatore chiave dell'espressione genica a livello traduzionale.
• eIF4A1 si localizza nel citoplasma, nella regione perinucleare e nella membrana cellulare; può inoltre essere presente nei granuli dello stress in condizioni di stress cellulare.
• La proteina è soggetta a diverse modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che possono modulare la sua attività e le sue interazioni.
• È codificata dal gene EIF4A1 (noto anche come DDX2A o EIF4A); lo splicing alternativo produce molteplici isoforme di questa elicasica DEAD-box conservata.
• eIF4A1 partecipa alle interazioni ospite-virus, poiché numerosi virus sfruttano il macchinario traduzionale dell'ospite per la sintesi delle proprie proteine.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) di eIF4A1 umano; pertanto, l'anticorpo può riconoscere specificamente l'epitopo N-terminale. Confermare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blotting, è prevista una banda intorno a 46 kDa (peso molecolare calcolato da UniProt: 46,2 kDa), sebbene la migrazione effettiva possa variare in base alla composizione del gel e alla preparazione del campione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di recupero antigenico e permeabilizzazione per rilevare eIF4A1 nelle sue frazioni citoplasmatiche e associate alla membrana.
• È stato riferito che l'anticorpo presenta reattività crociata con eIF4A1 di topo, ratto e scimmia; validare sempre la reattività e il rapporto segnale/rumore nei campioni di queste specie prima di studi su larga scala.
• Per l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA, considerare l'utilizzo di lisati freschi o conservati correttamente per preservare le interazioni e la conformazione della proteina.

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