eIF5A Coniglio pAb per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P63241

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eIF5A

• eIF5A (Fattore di iniziazione della traduzione eucariotica 5A-1) è un fattore di traduzione altamente conservato che promuove l'elongazione e la terminazione, salvando i ribosomi bloccati su motivi poliprolinici o altri. Riferimenti correlati: PMID:33547280
• Si lega tra i siti E e P del ribosoma, facilitando il trasferimento peptidilico durante la fase di CAT tailing come cofattore del controllo di qualità del ribosoma (RQC).
• eIF5A è coinvolto nella dinamica dell'actina, nella progressione del ciclo cellulare e nel decadimento dell'mRNA, e contribuisce alla risposta allo stress e al mantenimento dell'integrità della parete cellulare. Riferimenti correlati: PMID:16987817
• In complesso con la sintenina SDCBP, regola l'apoptosi dipendente da p53/TP53 e modula l'apoptosi mediata da TNF. Riferimenti correlati: PMID:15371445 PMID:15452064 PMID:17187778
• eIF5A media gli effetti delle poliammine sull'estensione e sopravvivenza dei processi neuronali, ed è necessario per l'autofagia migliorando la traduzione di ATG3 a un motivo specifico ASP-ASP-Gly, promuovendo la lipidazione di LC3B. Riferimenti correlati: PMID:17360499 PMID:29712776
• Come cofattore cellulare per le proteine HTLV-1 Rex e HIV-1 Rev, eIF5A è essenziale per l'esportazione nucleare degli mRNA virali non spicciati/parzialmente spicciati.
• La proteina si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana del reticolo endoplasmatico, ed è soggetta a modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e ipusinazione (formazione di ipusina in Lis-50). È espressa nelle cellule endoteliali della vena ombelicale e in varie linee cellulari tumorali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla proteina eIF5A umana a lunghezza intera (aa 1-154), che può rilevare sia le forme precursore che mature (ipusinate). L'ipusinazione della Lis-50 aggiunge ~113 Da, potenzialmente causando un leggero shift su SDS-PAGE; considerare l'uso di campioni preparati di fresco e sistemi di gel appropriati se è necessaria la discriminazione.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è ~17 kDa; assicurare condizioni di trasferimento adeguate per proteine a basso peso molecolare.
• eIF5A è filogeneticamente conservato; la reattività incrociata con il topo è stata confermata, mentre altre specie dovrebbero essere validate sperimentalmente.
• Nell'immunofluorescenza o nell'immunoistochimica, eIF5A può mostrare colorazione sia citoplasmatica che nucleare a seconda del tipo cellulare e della fissazione; ottimizzare la permeabilizzazione e validare nel sistema campione rilevante.
• ELISA e altri saggi immunoenzimatici possono richiedere titolazione; si raccomanda l'inclusione di controlli positivi (ad es., lisati HeLa, Jurkat) e negativi.

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