F4/80 mAb di coniglio per IF, IHC-P, ELISA - Q61549

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di F4/80

• F4/80, codificato dal gene Adgre1 (Emr1), è un recettore adesivo accoppiato a proteina G (GPCR) appartenente alla sottosottofamiglia EGF-TM7.
• La proteina full-length è una glicoproteina di superficie cellulare con un peso molecolare di circa 102 kDa, contenente più domini simili all'EGF e un dominio a sette transmembrane.
• F4/80 funziona come recettore orfano che si ritiene medii l'adesione cellulare e le interazioni cellula-cellula, in particolare all'interno del sistema immunitario.
• È espresso specificamente sulla superficie dei macrofagi, con i livelli più alti nei macrofagi maturi residenti nei tessuti, ma è assente dai macrofagi situati nelle aree T dei linfonodi e della milza.
• Una espressione a basso livello viene rilevata anche sui monociti del sangue, rendendo F4/80 un marcatore pan-macrofagico ben consolidato nei topi.
• Il recettore può contribuire allo sviluppo e alla funzione delle cellule T regolatorie (Treg), collegando l'immunità innata e quella adattativa.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e formazione di legami disolfuro, che sono tipiche delle proteine contenenti domini simili all'EGF e importanti per la stabilità strutturale.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è costituito da un frammento ricombinante (aa 367–645) della regione extracellulare di F4/80 di topo, che bersaglia una sequenza con una potenziale minore interferenza da glicosilazione; verificare che questo epitopo sia esposto nei vostri campioni fissati.
• Per l'immunofluorescenza (IF) su sezioni incluse in paraffina (IF-P), prendere in considerazione il recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6.0) o EDTA (pH 9.0) e ottimizzare le condizioni di incubazione dell'anticorpo primario in base al tipo di tessuto.
• Nell'immunoistochimica su sezioni di paraffina (IHC-P), convalidare l'anticorpo in un controllo positivo noto per F4/80 (ad esempio, cellule di Kupffer del fegato di topo o macrofagi della polpa rossa della milza) e includere un controllo di isotipo per valutare la colorazione di fondo.
• Durante l'esecuzione dell'ELISA, utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento contro la proteina ricombinante F4/80 di topo e verificare la reattività crociata con F4/80 di ratto se il saggio è destinato a campioni di ratto.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, offre coerenza tra lotti; tuttavia, confermare la reattività specifica nel vostro sistema sperimentale, specialmente se si utilizzano modelli knockout o knockdown.

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