FGD4 Rabbit pAb (Anticorpo Policlonale) per WB, ELISA - Q96M96

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FGD4

• FGD4, noto anche come proteina 4 contenente domini FYVE, RhoGEF e PH, proteina legante i filamenti di actina frabin, o proteina legante F-actina correlata a FGD1, è codificato dal gene FGD4 e presenta molteplici isoforme dovute allo splicing alternativo.
• FGD4 funge da fattore di scambio di nucleotidi guaninici (GEF) che attiva specificamente CDC42, una GTPasi della famiglia Rho, catalizzando lo scambio di GDP con GTP, regolando così l'organizzazione del citoscheletro di actina e la forma cellulare.
• La proteina si localizza nel citoplasma, si associa al citoscheletro di actina ed è presente anche nelle proiezioni cellulari come i filopodi, dove influenza la dinamica dell'actina.
• FGD4 è espresso in vari tessuti tra cui cervello, cervelletto, nervo periferico, muscolo scheletrico, cuore, utero, placenta e testicolo, indicando ruoli fisiologici ampi ma specifici.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e la proteina contiene domini funzionali come il dito di zinco di tipo FYVE, riflettendo le sue proprietà di legame ai metalli e di regolazione delle fosfoproteine.
• Le mutazioni in FGD4 sono associate alla malattia di Charcot-Marie-Tooth tipo 4H (CMT4H), un disturbo neurodegenerativo, evidenziando il suo ruolo critico nella funzione del nervo periferico.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per il Western blot (WB), prevedere una banda intorno a 87 kDa coerente con il peso molecolare previsto; convalidare utilizzando controlli positivi appropriati derivati da tessuti che esprimono FGD4 (es. cervello, nervo periferico o muscolo scheletrico).
• Dato che l'immunogeno copre gli amminoacidi 99–198, considerare la possibilità di rilevare molteplici isoforme; verificare con metodi di rilevamento alternativi se è necessaria una risoluzione specifica per isoforma.
• Nelle applicazioni ELISA, standardizzare le concentrazioni di rivestimento e le diluizioni degli anticorpi utilizzando la proteina FGD4 ricombinante o lisati cellulari per stabilire rapporti segnale/rumore ottimali.
• Poiché FGD4 è coinvolto nella regolazione del citoscheletro, i protocolli di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare l'accessibilità dell'epitopo; testare diverse condizioni quando si utilizza l'immunofluorescenza.
• Confermare la reattività crociata in campioni di topo e ratto utilizzando lisati appropriati, poiché l'omologia di sequenza può portare al rilevamento degli ortologhi roditori.

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