Anticorpo monoclonale coniugato FITC di coniglio contro CD32 di topo per citometria a flusso - P08101

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del recettore II della regione Fc delle immunoglobuline gamma a bassa affinità (CD32)

• Codificato dal gene Fcgr2b, il recettore Fc gamma IIB (CD32) è un recettore a bassa affinità per la regione Fc delle IgG complesse, esistente in più isoforme (IIB1, IIB1', IIB2 e una IIB3 secreta) generate da splicing alternativo.
• Le funzioni principali includono la fagocitosi dei complessi immunitari, la modulazione della produzione di anticorpi da parte dei linfociti B e la downregolazione dell'attivazione di linfociti B, linfociti T e mastociti dopo il coimpegno con i recettori antigenici.
• L'isoforma IIB2 media l'endocitosi dei complessi immunitari solubili tramite le caveole rivestite di clatrina, mentre IIB1 e IIB1' formano cappucci ma non si internalizzano.
• Il recettore è ampiamente espresso nelle cellule di origine ematopoietica: IIB1 è presente preferenzialmente nella linea linfoides, IIB2 nella linea mieloide e IIB3 è secreta dai macrofagi nel siero.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, i compartimenti citoplasmatici/citoscheletrici e, per l'isoforma IIB3, la secrezione.
• Le caratteristiche post-traduzionali includono legami disolfuro, glicosilazione e fosforilazione (fosfoproteina), coerenti con la sua architettura a domini di immunoglobulina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (aa 30–207), quindi l'anticorpo riconosce probabilmente il dominio di legame del ligando comune alle principali isoforme; tuttavia, la rilevazione isoforma-specifica deve essere validata nel sistema di campioni corrispondente.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo coniugato FITC su una linea cellulare nota che esprime CD32 (ad esempio, splenociti di topo o una linea di macrofagi) per determinare la concentrazione di colorazione ottimale e minimizzare il legame non specifico.
• Includere controlli di isotipo appropriati e passaggi di blocco dei recettori Fc per garantire la specificità durante l'analisi di cellule ematopoietiche fresche.
• Tenere conto che il peso molecolare osservato può variare (31–36 kDa) a seconda della glicosilazione e dell'isoforma; confermare la rilevazione tramite Western blotting se è necessaria una validazione incrociata tra applicazioni.

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