Anticorpo monoclonale coniglio anti-Ratto CD45 coniugato con FITC per FC - P04157

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD45

• Il CD45, noto anche come antigene comune dei leucociti (L-CA) e T200, è codificato dal gene PTPRC nei ratti. È una fosfatasi proteica tirosinica di tipo recettoriale essenziale per l'attivazione delle cellule T attraverso il recettore degli antigeni.
• La proteina possiede due domini fosfatasi; il primo dominio è cataliticamente attivo, mentre il secondo modula la specificità del substrato. Il CD45 defosforila molecole di segnalazione chiave come SKAP1, FYN e LYN all'attivazione delle cellule T.
• Il CD45 agisce come regolatore positivo della co-attivazione delle cellule T dopo il legame con DPP4, e interagisce con CLEC10A all'interfaccia tra cellula presentatrice l'antigene e cellula T per modulare le soglie di attivazione e limitare l'autoreattività.
• È localizzato sulla membrana cellulare, specificamente arricchito nei raft di membrana e alla sinapsi immunologica, dove partecipa alla segnalazione del recettore delle cellule T.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme; nei ratti, l'isoforma 1 e l'isoforma 2 si trovano nei timociti e nei linfonodi, mentre l'isoforma 3 e l'isoforma 4 sono rilevate nei linfonodi.
• Le modifiche post-traduzionali includono una forte glicosilazione e fosforilazione, che sono critiche per la sua funzione e l'interazione con i ligandi.
• La proteina è classificata tra le idrolasi, le fosfatasi proteiche, ed è una glicoproteina transmembrana coinvolta in processi immunitari chiave.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli aminoacidi 24–546 del CD45 di ratto, che probabilmente corrispondono al dominio extracellulare. Questo design genera tipicamente anticorpi che riconoscono il CD45 espresso sulla superficie cellulare, adatti per la citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tipo di cellule specifico e le condizioni di colorazione. Utilizzare controlli di isotipo appropriati e controlli di compensazione a colorazione singola.
• Dato che il CD45 è un marcatore pan-leucocitario, assicurarsi che la preparazione del campione preservi gli antigeni di superficie dei leucociti; si raccomandano cellule fresche o criopreservate correttamente.
• Considerare che le isoforme del CD45 variano tra i sottotipi di leucociti e gli stati di attivazione; validare il pattern di colorazione dell'anticorpo sulle popolazioni target per confermare la reattività con la/e isoforma/e pertinente/i.

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