Anticorpo monoclonale di coniglio contro Galectin 3/LGALS3 per WB, IHC-P, IP, ELISA - P17931

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Galectin-3

• La Galectin-3 (conosciuta anche come lectina da 35 kDa, CBP35, GALBP, proteina legante IgE, L-31, proteina legante la laminina, lectina L-29 e antigene Mac-2) è una lectina specifica per il galattosio codificata dal gene LGALS3 nell'uomo.
• Si lega all'IgE e media la migrazione delle cellule endoteliali stimolata da CSPG4 tramite interazione con l'integrina alfa-3 beta-1. Insieme a DMBT1 è necessaria per la differenziazione terminale delle cellule epiteliali colonnari durante l'embriogenesi iniziale (per similarità).
• Nel nucleo, la Galectin-3 agisce come fattore di splicing pre-mRNA, partecipando alla lavorazione e al splicing dell'mRNA.
• Svolge un ruolo nelle risposte infiammatorie acute, tra cui l'attivazione e l'adesione dei neutrofili, il chemiotattismo di monociti/macrofagi, l'opsonizzazione dei neutrofili apoptotici e l'attivazione dei mastociti.
• Insieme a TRIM16, la Galectin-3 coordina il riconoscimento delle endomembrane danneggiate con la mobilizzazione dei regolatori fondamentali dell'autofagia ATG16L1 e BECN1, collegando l'immunità innata all'autofagia.
• La proteina si localizza nel citoplasma, nel nucleo ed è anche secreta. La maggiore espressione si riscontra nell'epitelio del colon, nei macrofagi attivati e nelle membrane fetali.
• Le parole chiave associate alla Galectin-3 includono acetilazione, fosforilazione, legame disolfuro, immunità, lectina, spliceosoma e identificazione proteomica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1–100 della Galectin-3 umana. Questa regione N-terminale è distinta dal dominio di riconoscimento dei carboidrati e può facilitare la rilevazione sia della forma full-length che di quella tagliata.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 26 kDa, ma a causa delle modifiche post-traduzionali e della propensione della proteina a formare multimeri, si possono osservare sia bande monomeriche che di peso molecolare maggiore; si consiglia di includere agenti riducenti nei tamponi per campioni.
• Nell'immunohistochimica (IHC-P), tenere presente che la Galectin-3 può essere citoplasmatica, nucleare o secreta; potrebbero essere necessari metodi di recupero dell'antigene e devono essere inclusi controlli appropriati per confermare la specificità della colorazione.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con la Galectin-3 di topo e ratto, risultando adatto per studi traslazionali in queste specie; tuttavia, convalidare i livelli di espressione nel tessuto bersaglio prima di effettuare confronti quantitativi.
• Per l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA, la natura monoclonale dell'anticorpo garantisce prestazioni costanti tra lotti; ottimizzare empiricamente la concentrazione dell'anticorpo per ogni formato di saggio.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati, come linee cellulari con espressione nota di Galectin-3 (ad esempio macrofagi, cellule epiteliali colonnari) e modelli di knockout o knockdown, ove possibile.

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