Anticorpo policlonale coniglio GBP1 per WB, ELISA - P32455

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del GBP1

• La proteina 1 legante il guanilato (GBP1), indicata anche come proteina 1 legante il GTP (GBP-1) o proteina 1 legante il guanilato indotta da interferone (hGBP1), è una GTPasi inducibile da interferone (IFN) codificata dal gene GBP1 nell'uomo.
• Il GBP1 idrolizza il GTP in GMP in due reazioni di clivaggio sequenziali: il GTP viene prima convertito in GDP e poi ulteriormente in GMP in modo processivo. Riferimenti correlati: PMID:16511497, PMID:32510692, PMID:7512561
• Svolge ruoli critici nell'immunità innata conferendo protezione contro un ampio spettro di patogeni, inclusi infezioni batteriche (L. monocytogenes, M. bovis BCG), virali (virus dell'influenza) e protozoarie (T. gondii). Riferimenti correlati: PMID:16511497, PMID:22106366, PMID:29144452
• Il GBP1 agisce come regolatore positivo dell'assemblaggio dell'inflammasoma: dopo il rilascio del patogeno nel citosol, forma un rivestimento proteico dipendente dalla GTPasi che incapsula i batteri, si lega direttamente al lipopolisaccaride (LPS), interrompe la barriera dell'antigene O e promuove il rilevamento da parte dell'inflammasoma non canonico caspasi-4/11. Riferimenti correlati: PMID:32510692, PMID:32581219, PMID:31268602
• Partecipa all'autofagia interagendo con la proteina legante l'ubiquitina SQSTM1, consegnando proteine mono-ubiquitinate agli autolisosomi per la generazione di peptidi batteriolitici.
• A livello subcellulare, il GBP1 si trova sulle membrane delle vescicole citoplasmatiche, sulle membrane dell'apparato di Golgi, sulla membrana cellulare, nel citosol e può essere secreto.
• Le modifiche post-traduzionali includono la prenilazione (isoprenilazione) per il targeting delle membrane, la fosforilazione e l'ubiquitinazione (coniugazione Ubl).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aminoacidi 383–592) del GBP1 umano; pertanto, ci si aspetta una reattività con il GBP1 a lunghezza intera, ma la reattività crociata con membri della famiglia GBP strettamente correlati deve essere convalidata sperimentalmente.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati di cellule stimolate da interferone (es. cellule HeLa o A549 trattate con IFN-γ) dove l'espressione endogena del GBP1 è fortemente up-regolata, e ottimizzare la diluzione dell'anticorpo per ottenere una banda chiara a ~68 kDa.
• Nelle applicazioni ELISA, l'immunogeno ricombinante può essere utilizzato come controllo di rivestimento positivo per stabilire curve standard e sensibilità del saggio; convalidare le prestazioni con la proteina nativa nei campioni biologici.

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